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加压毛细管电色谱法测定头孢菌素 杨春梅。丁康。林旭聪，谢增鸿’ (福州大学食品安全和环境监测技术研究所，福州350108) 生素(头孢哌酮、头孢呋辛、头孢噻吩和头孢克肟)的加压毛细管电色谱分析方法。在优化的色谱条 件下，头孢哌酮、头孢呋辛、头孢噻吩和头孢克肟的检出限(3S／N)在0．5～o．8mg·L1之间，出峰 分析尿液和牛奶样品，测定回收率分别在94．2％109．6％和85．4％～102．4％之间。 中图分类号：0657．8 文献标志码：A 文章编号：1001_4020(2011)增刊-0017-03 影响。 加压毛细管电色谱(pCEC)是指在毛细管电色 谱柱一端或两端通过泵施加压力的一种技术，压力 1试验部分 的引入使CEC分离过程受pH值和缓冲溶液的限 制相对减少，可有效地解决CEC的气泡问题，同时 1．1仪器与试剂 GV加压毛细管电色谱仪，自制 还加快分离速度、缩短分离时间口]。近年pCEC被 TrisepTM一2100 视为微分离领域的研究热点，已被广泛应用于分离 毛细管电色谱柱(内径100弘m，外径375pm，长度 60 技术中[2]。头孢菌素具有高效、低毒、广谱、副作用 cm，有效分离长度35cm，自制)。 少等特点，在临床上应用非常广泛，有必要对头孢菌 头孢哌酮、头孢呋辛、头孢噻吩和头孢克肟标准 素进行分析检测。同时分析头孢菌素不仅限于医药 储备溶液：1．0×104mg·L～。 领域，在食品领域和环境保护方面也需要分析检测， 乙腈为色谱纯。 如牛奶中残余的抗生素、食用的动物肉食、医院和屠 1．2仪器工作条件 宰场的废水等。目前，头孢菌素检测方法主要有高 分离电压为一18kV，反压阀压力为 1．206 效液相色谱一紫外分光光度检测器(HPLC-UV)[引，MPa，流动相为pH4．0的25mmol·L_1磷 酸盐缓冲溶液与乙腈按体积比90比10混合的溶 高效液相色谱一质谱法(HPL，C-MS)[4]，液相色谱一质 nlIl。 液，流量为0．05mL·min一，检测波长254 谱法(LC-MS)[5l，气相色谱一质谱法(GC-MS)C6]和 1．3试验方法 毛细管电泳一紫外分光光度检测器(CE-UV)[7]，而用 毛细管电色谱技术测定头孢菌素的报道较为少见。 参照文献E8]方法，不同样品处理方法如下：取 健康人尿液1．5 本工作基于自制聚(0MA-co-EDMA-co-SP— MA)疏水毛细管整体柱，采用加压毛细管电色谱法 100肛I。，再加入水14mL，振荡混匀，于4℃冷冻保 000 测定了4种头孢菌素类抗生素(头孢哌酮、头孢呋 存15min。取出后以3 r·min_1的转速离心 15 辛、头孢噻吩和头孢克肟)，并考察了流动相因素和 min，取上层清液，过0．22弘m尼龙膜，所得滤液 仪器工作参数对4种头孢菌素类抗生素分离效果的 用水稀释10倍后，取20弘L进样检测。