昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞的培养方法研究.pdfVIP

维普资讯 · 72 · SICHUANJOURNALOFANATOMYVOL．14 NO．4 2006 院采取专业词汇的教学。在脑神经教学中，板书出主要的词 生写出所指结构的汉语名称 ，同时学生不 自觉地复习到了英 汇，通过专业发音软件使学生读准发音 ，同时让学生 自已书写 语单词，有的是版书过的和学生 自已写过的，通过这种方式的 出单词 ，教学中涉及到这些单词时。用英语代替汉语，反复的 巩固，学生基本上能掌握一定数量的单词 强调，学生印象很深。教学多媒体运用时，采取 国外的图谱软 通过多种教学法的应用，既提高了学生的学习兴趣，叉使 件，因为全是英语标注，学生不得不去认知这些单词。在脑神 学生横向纵向联系，对于脑神经的学习相对来说就比较容易， 经的检测中，用英语标注的图谱 ，教师指出要检测的结构，学 而且达到了教学大纲的要求。 · 技术交流 · 昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞的培养方法研究 史 恺，徐 立，邓仪昊，陈道邦 (四川大学基础医学与法医学院解剖教研室 610041) 1型糖尿病是由于 自身免疫或者其他特殊原因引起的胰 在培养皿中尽量去除周围结缔组织后将所需组织移入一装有 岛B细胞破坏，造成胰岛索的绝对不足，从而引起以高血糖为 无血清培养基的小玻瓶中，用眼科剪将其剪为 l舢m2的碎块， 特征的代谢紊乱[1]。患者为了生存必须接受外源性胰岛索治 倾去培养基并用灭菌PBS清洗三次。加入两倍组织体积的胶 疗。尽管外源性胰岛素可以降低血糖，改善症状。但是其疗 原酶于 37℃震荡消化 40rain。消化完毕，加入含 1O FBS 效是暂时的，患者必须终生使用。因而胰岛移植是一个有希 的培养基终止消化，1100rpm，离心 5rain。倾去上清液，加人 望完全治愈糖尿病的治疗手段，但是由于当前移植用胰岛细 DMEM(糖含量 1000mg／L，含 1O FBS)重新制备为细胞悬 胞主要来源于尸体 ，这个来源的胰岛细胞根本不能满足 1型 液并计数。将细胞悬液种入培养瓶。分别在 24h、48h、72h 糖尿病患者的需要。如何寻找一个稳定的胰岛细胞来源成为 换液以利用贴壁时间的差异去除腺细胞。从 72h开始更换 当今的热点问题 引【。干细胞作为具有全能分化潜能的细胞可 为低血清含量 DMEM(糖含量 1000mg／L，含 2 FBS)，利用 以向内、中、外三个胚层的任何细胞分化。那么在理论上从干 具有干细胞特性的胰腺导管上皮样细胞可以在无血清培养基 细胞可以衍生出任何一种细胞。而且干细胞在体外培养时只 中生长的特点使其在低营养环境下形成对成纤维细胞的生长 要保持在未分化状态就可以无限传代，并且反复传代以后也 优势。每 3d换液一次，每隔 15d传代一次。 并不影响其分化能力，这一特性使干细胞有希望成为一个非 1．5 免疫细胞化学染色鉴定：取第三代细胞消化后接种 常稳定的细胞库[3]。干细胞主要包括胚胎干细胞、生殖干细 在 6孔培养板 中，培养板 中放入经 AEPS处理的爬片用盖玻 胞和成体干细胞[4]。通过对胚胎发育的研究，发现胰岛是由 片}待细胞在含2 胎牛血清的低糖型DMEM中培养 7d时 一 组 ck-19阳性的胰腺导管上皮细胞在一定发育阶段向外分 取出盖玻片；将盖玻片置于培养皿中加 8O％冷丙酮固定 15 泌组织中移行形成的。据此，提出胰腺的成体干细胞存在于 rain，取出后 PBS漂洗 3次，3min／次；0．5 Triton-xl00破膜 胰腺导管上皮细胞之中，研究者称其为胰腺导管上皮样细 10rain，取出后 PBS漂洗 3次，3mln／次；3 双氧水耗竭内源 胞 l6]。相对于体外培养胚胎干细胞的严格要求、繁琐步骤和 性过氧化物 1Orain，取出后PBS漂洗 3次，3m