GB/T 5009.183-2003植物蛋白饮料中脲酶的定性测定.pdf

ICS87.044 C 53 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T5009.183-2003 部分代替GB16322-1996 植物蛋白饮料中脉酶的定性测定 Qualitativeanalysisofureaseinvegetableproteindrinking 2003-08-11发布 2004-01-01实施 中华 人 民共 和 国卫 生 部 *， 中 国 国家 标 准化 管理 委 员 会 ‘’卜 GB/T5009.183-2003 前 言 本标准代替GB16322-1996《植物蛋白饮料卫生标准》中附录A脉酶定性测定方法”。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准由辽宁省食品卫生监督检验所、北京市食品卫生监督检验所、天津市食品卫生监督检验所负 责起草 。 本标准主要起草人:王旭太、徐继康、杨玉芝、徐留发、陆守政。 GB/T5009.183-2003 植物蛋白饮料中腺酶的定性测定 范围 本标准规定了植物蛋白饮料中脉酶的定性测定方法。 本标准适用于植物蛋白饮料中脉酶的定性测定 2 原理 脉酶在适当的pH和温度下催化尿素，转化成碳酸钱，碳酸按在碱性条件下形成氢氧化按，再与纳 氏试剂中的碘化钾汞复盐作用形成碘化双汞铁，如试样中脉酶活性消失，上述反应即不发生。 NH,CONH,+2H}O里竺(NH,)zCO, (NH,),CO,+2NaOH- NaiCOa+NH,OH 2K2[Hgl,]+3KOH+NH,- NH2Hg2Ol+7KI+2H20 (黄棕色沉淀) 3 试剂 3,1 1%尿素溶液。 3.2 10%钨酸钠溶液 3.3 2%酒石酸钾钠溶液。 3.4 5%硫酸。 3.5 中性缓冲液:取0.067mol/L磷酸氢二钠溶液611mL，加人389mL0.067mol/L磷酸二氢钾溶 液混合均匀即可。 3.5.1 0.067mol/L磷酸氢二钠溶液:称取无水磷酸氢二钠9.47g溶解于 1000mL水中。 3.5.2 0.067mol/L磷酸二氢钾溶液:称取磷酸二氢钾9.07g溶于 1000mL水中即成。 3.6 纳氏试剂:称取红色碘化汞(Hgl,)55g,碘化钾41.25g溶于250mL水中，溶解后，倒人1000mL 容量瓶中。再称取氢氧化钠 144g,溶于500mL水中，溶解并冷却后，再缓慢地倒人以上 1000mL容 量瓶中，加水至刻度，摇匀后倒人试剂瓶，静止后用上清液。 4 分析步骤 4.1取10mL比色管甲、乙两支，各加人。1g试样，再各加1mL水，振摇半分钟(约100次)，然后各 加人中性缓冲液 1ml。 4.2 向上两管中的甲管(试样管)中加人尿素溶液 1ml，再向乙管(空白对照管)中加人 1mL水，将 甲、乙两管摇匀置于40℃水浴中保温20min. 4.3 从水浴中取出二管后，各加4ml，水，摇匀再加 10%钨酸钠溶液 1mL,摇匀，再加5%硫酸 1mL, 摇匀过滤备用。 4.4 取上述滤液2m1分别加人25mL具塞纳氏比色管(配套管)中，再按下述步骤操作。 4.4.1 各加水 15m1后再加人2写酒石酸钾钠 1mL. 4.4.2 各加人纳氏试剂2ml后再加水至25mL刻度。 4.5 摇匀后观察结果 (见表 1)0 GB/T5009.183-2003 表 1 脉酶定性 表示符号 显示情况 强阳性 + + + + 砖