GB/T 5009.194-2003保健食品中免疫球蛋白IgG的测定.pdf

ICS67.040 C 53 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T5009.194-2003 保健食品中免疫球蛋白IgG的测定 Determinationofimmunoglobulininhealthfoods 2003-08-11发布 2004-01-01实施 中华 人 民共 和 国卫 生 部 食太 中 国国家标准化管理委员会 “.‘ GB/T5009.194-2003 目U 吕 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。 本标准主要起草人:杨祖英、宋书锋。 GB/T5009.194-2003 引 言 免疫球蛋白IgG，目前已作为功效成分添加于保健食品中，该成分对于增强免疫力、调节动物体的 生理功能和某些特定物质的代谢等均有一定效果。本方法在参考新西兰健康食品有限公司免疫球蛋白 IgG测定方法的基础上，根据我国的仪器设备条件进行改进，建立了片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免 疫球蛋白含量的高效液相色谱测定方法。 GB/T5009.194-2003 保健食品中免疫球蛋白IgG的测定 1 适用范围 本标准规定了保健食品中免疫球蛋白IgG的测定方法。 本标准适用于片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白IgG的测定。 本方法检出限:当取样量0.1g,稀释至25mL，进样量20pL时，检出浓度为。.5mg/mL, 2 原理 根据高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白IgG与配基连接，在pH2.5的盐酸 甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG, 试剂 3.1流动相A:pH6.5,0.05mol/L磷酸盐缓冲液。 3.2 流动相B:pH2.5,0.05mol/L甘氨酸盐酸缓冲液。 3.3 IgG标准贮备液:称取IgG标准品(Sigma化学公司)0.0100g，用流动相A(3.1)溶解并定容至 10.0mL，摇匀，浓度为1.0mg/mL, 3.4 IgG标准系列溶液:取 IgG标准贮备液，用流动相 A(3.1)稀释成含 IgG 0.2,0.4,0.6,0. 1.0mg/mL的标准系列。临用时配制。 仪器和设备 高效液相色谱仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。 5 分析步骤 5.1 试样处理:称取 0.1g精确至 。001g)试样，用流动相 A(3.1)稀释至25.0mL,M匀，通过 0.45}cm微孔滤膜后进样。 5.2 先用5倍柱体积的重蒸水洗柱，再用 10倍柱体积的流动相A(3.1)平衡柱，进样，按洗脱程序进行 洗脱 。 5.3 HPLC参考条件 色谱柱:PharmaciaHI-TrapProteinG柱，1mL, 波长:280nn, 进样量:20yL, 梯度洗脱表见表 1, 表 1 时间 流速/(mL/min) A/(%) B/(%) 梯度 0 0.4 100 0 4.5 0.4 100 0 6 5.5 0.4 0 100 6 15.0 0.4 0 100 6 15.5