GB/T 5009.185-2003苹果和山楂制品中展青霉素的测定.pdf

ICS 67.040 C 53 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T5009.185-2003 部分代替GB14974-1994 苹果和山植制品中展青霉素的测定 Determinationofpatulininappleandhawthornproducts 2003-08-11发布 2004-01-01实施 中华 人 民共 和 国卫 生 部 *， 中 国 国家 标 准 化 管理 委 员会 ‘’.‘ GB/T5009.185-2003 oli 吕 本标准代替GB14974-1994((苹果和山檀制品中展青霉素限量卫生标准》中第3章检验方法。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准由中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所负责起草。 本标准主要起草人:吴南、刘勇、刘兴介。 GB/T5009.185-2003 苹果和山植制品中展青霉素的测定 1 范 围 本标准规定了苹果和山植制品中展青霉素的测定方法。 本标准适用于苹果和山植制品中展青霉素的测定。 本标准检出限为:3f}g/Lo 2 原理 试样中展青霉素经提取、净化、浓缩、薄层展开后，利用薄层扫描仪进行紫外反射光扫描定量。 3 试剂 3.1 硅胶GF211e 3.2 薄层色谱展开剂 横向:氯仿一丙酮(30+1.5);纵向:甲苯一乙酸乙醋一甲酸(50十15+1)e 3.3 展青霉素标准品。 3.4 乙酸乙醋。 3.5 1.5%碳酸钠溶液。 3.6 无水硫酸钠。 3.7 三氯甲烷。 3.8 显示剂:溶解。.1gMBTHHCIHBO3一甲基一2苯并唾哇酮膝水合盐酸盐于20mL蒸馏水中， 置于冰箱中保存，每3天重新配制。 4 仪器 4 . 1 薄层扫描仪。 4 2 层析槽(内径 11.5cm,高20cm的标准击)。 玻璃板10cmx10cm, :.:紫外光灯。 操作方法 5.， 提取 5.1.1 果汁、果酒:量取果汁25mL,置于分液漏斗中，加人等体积的乙酸乙醋，振摇2min，静置分层， 重复以上步骤两次，合并有机相，加2.5mL1.5%碳酸钠振摇 1min，静置分层后，弃去碳酸钠层，同上 步骤再用碳酸钠处理一次。将提取液滤人 100MI梨形瓶中，于40℃水浴上用真空减压浓缩至近干，用 少许三氯甲烷清洗瓶壁，浓缩干，加三氯甲烷0.4mL定容，供薄层色谱测定用。 5.1.2 果酱:称取试样25g置于乳钵中，加适量无水硫酸钠研磨后，称至三角瓶中，加80mL乙酸乙醋 浸泡30min，振荡30min，过滤，取滤液50mL，以下操作同S.1.1, 5.2 测定 5.2.1 薄层板的制备:取硅胶GFzs5g，加水 15mL,涂布10cmx10cm玻璃板上，一次涂成5块，薄 层厚度为 。.3mm，阴干后，105r烘烤2h，放人干燥器中备用。 5.2.2 点样:取一块薄板，在距底边和右边 10cm处，用微量注射器滴加 1.0jig/mL的展青霉素标准 液 10pL，相距左边4cm处滴加]10川 样液，在试样点同一垂直线上，距顶端2cm处点20ng的标准 4吕5 GB/T5009.185-2003 液，为位置参考点。 5.2.3 展开:横向展开到顶端后取出挥干，进行纵向展开，至顶端后，取出挥干，在254nn 紫外灯下观 察，出现黑色吸收点则试样为阳性。进行扫描定量测定。 5.2.4 薄层色谱扫描测定:仪器操作条件:测定波长270nm;参考波长310nm;反射光测定;扫描速度 40nm/min;记录仪纸速20nm/min;测定标准及试样中展青霉素峰面积。