皮粘散对慢性皮肤溃疡大鼠模型EGF、bFGF影响研究.pdfVIP

皮粘散对慢性皮肤溃疡大鼠模型EGF、bFGF影响的研究 陈明岭1 李宇轩2 王宇1 成都中医药大学附属医院，610072 成都中医药大学第二临床学院，610075 摘要 目的：研究临床确有疗效的外用制剂皮粘散治疗慢性皮肤溃疡的作用及其机制；方法：通过外伤复 合冰醋酸复制慢性皮肤溃疡大鼠模型，观察皮粘散对溃疡面积的影响，以免疫组织化学法检测创面组织中 表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达，最后结合组织病理学验证皮粘散的治疗作 用；结果：皮粘散可明显减少慢性皮肤溃疡大鼠的溃疡面积，同时也能上调创面组织中EGF和bFGF的表 达，此外，组织病理学结果表明，皮粘散也可促进肉芽组织、纤维胶原及新生血管的生长，加速溃疡创面 愈合；结论；皮粘散对慢性皮肤溃疡有较好的治疗作用，其机制与上调EGF及bFGF的表达有关。 关键词：皮粘散；慢性皮肤溃疡；表皮生长因子；碱性成纤维细胞生长因子 性皮肤溃疡模型。各组于造模后一周开始给药，换药前首先以1：5000呋喃西林溶液清洁创面；皮粘散治疗 组大鼠创面清洁后，以无菌棉签将创面拭干，然后将皮粘散“飞”到创面上，外用两层消毒干纱布覆盖固定； 阳性组大鼠创面清洁后，用无菌棉签将创面拭干，然后将表皮生长因子外用溶液喷于创面处，用药剂量为 100IU／cm2创面，外用两层消毒干纱布覆盖固定；连续治疗8天，每天换药1次i模型对照组清洁创面后 直接用两层消毒干纱布覆盖后用医用胶带固定。 2．2溃疡面积 分别于治疗后第2、4、8天时，用玻璃纸覆盖溃疡面，用笔划出溃疡面边缘，沿边缘剪下玻璃纸， 置分度值为0．1mg的电子天平称重，按质量／面积比值换算成面积(mm2)。 2．3组织病理学 新鲜肉芽组织，10％中性甲醛固定，经过不同浓度乙醇梯度脱水、二甲苯透明、石蜡包埋切片：脱蜡后以 肉芽组织、胶原纤维、新生血管生长等指标。 2．4免疫组织化学法 大鼠处死后，取溃疡局部组织或新鲜肉芽组织，按照组织病理学检查中的方法制备常规石蜡切片。切 片以蒸馏水冲洗3次，O．01M 显色剂，室温下显色3min。最后蒸馏水洗涤，苏木素轻度复染，盐酸酒精分化，经脱水、透明、封片后， 常规光学显微镜观察(×400倍)，并测定积分光密度(IOD)，表示蛋白表达强度。 3实验结果 3．1对溃疡面积及新生肉芽组织生长情况的影响 在整个实验过程中，共有4只大鼠死亡，每组各1只。大鼠造模后，体重下降，较为瘦削，毛色暗淡 无光，行动迟缓，活动减少，皮肤缺损处溃疡明显，经治疗后大部分大鼠的上述症状均有不同程度的好转。 与模型对照组比较，给药后第2、4、8天时，阳性对照组及皮粘散高剂量组大鼠的溃疡面积明显小于 组(正O．OI)；上述结果提示皮粘散对缺损性慢性皮肤溃疡大鼠的溃疡创面有较好的促愈合作用。结果见 表1。 表l 皮粘散对缺损性皮肤溃疡大鼠溃疡区域面积的影响(妊s，cm2) 注：与模型对照组比较，4p0．05，·宰∥0．01。 第十三次植床焉理史会论文汇蠕 5 3．2对溃疡组织中EGF及bFGF表达的影响 与模型对照组比较，经过皮粘散及表皮生长因子外用溶液治疗的皮肤溃疡大鼠局部溃疡组织中EGF 的表达；结果详见表2。 表2 皮粘散对缺损性皮肤溃疡大鼠溃疡组织EGF及bFGF表达的影响(妊s) 注：与模型对照组比较，木pO．05，+宰p0．01。 3．2组织病理学结果 大鼠溃疡组织HE染色后，观察其炎性细胞、肉芽组织，新生毛细血管、纤维增生等情况，结果如下。 模型对照组：表层皮肤}{5现大量坏死物及炎性细胞浸润，肉芽厚度不均且不完整，胶原纤维呈现少量增生； 阳性组：皮肤坏死层较薄，胶原纤维、肉芽组织大量增生，并可见新生血管垂直向上生长；皮粘散高剂量 组：表层皮肤可见一定最的炎性坏死物，胶原纤维大量增生，肉芽组织增生，并见新生血管垂直向上生长； 皮粘散低剂量组：皮肤表层可见大量炎性坏死物，胶原纤维、肉芽组织增生，也可见新生血管。HE染色 结果见图1。 6第十三次临床蔼理大会论文汇编 AntimicrobialpropertiesofextractsfromSalviaPrzewalskiiMaximagainst Staphylococcusaureusinvitroandinvivo YaoL