三聚氰胺与其同系物三聚氰酸对小鼠肾脏组织细胞的损伤研究.pdfVIP

T010096 三聚氰胺及其同系物三聚氰酸对小鼠 肾脏组织细胞的损伤研究 陈 茜+ 袁慧“ (湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128) 摘要：目的：探讨三聚氰胺及其同系物三聚氰酸引起的肾脏组织细胞的损伤，为防制三聚氰胺对动物危害提供实 验依据．方法：雄性s叫、鼠随机分为5组，每组20只，体重20一309。对照组蒸馏水灌胃，染毒组采取隔天灌胃方式，三 聚氰胺单独组250mg／kg·bw，三聚氰胺与三聚氰酸混合物(三聚氰胺+三聚氰酸等量混合)高、中、低剂量组分别按250 以及丙二醛(MDA)含量，观察肾组织形态学．结果：三聚氰胺与三聚氰酸混合物能引起明显的肾脏损伤，呈剂量相关性． 表现为BUN和CRE升高，SOD；g性降低，MDA水平升高，组织形态学观察可见明显肾小管损害。结论：三聚氰胺与三聚氰酸 的混合物能引起明显的肾脏组织损伤。 关键词：三聚氰胺；三聚氰酸；肾损伤 三聚氰胺引起的宠物中毒以及毒奶粉事件受到了全世界各国的广泛关注。三聚氰胺和三聚氰酸本身 是重要的有机化工中间产品。三聚氰胺对大鼠的慢性研究表明能引起输尿管和膀胱结石的形成，并且雄 性大鼠显著高于雌性大鼠【lo】。三聚氰酸钠对雄性大鼠和小鼠亚急性研究发现主要是导致膀胱结石和膀 胱上皮增生，对狗的慢性研究发现能导致肾纤维化，远曲小管和集合管上皮增生、扩张，同时还发现甲 状腺萎缩，淋巴细胞浸润【41。三聚氰酸钠对孕兔能造成体重减轻甚至死亡f5】。对猫的亚慢性毒性试验提 示实验动物存在肾衰竭的可能Ib】。 三聚氰胺或三聚氰酸对猫、SD大鼠、小鼠和猪的急性毒性作用很低，相对于啮齿类动物，花鲈对 三聚氰胺毒性反应更为敏感。但三聚氰胺和三聚氰酸两者混合后在48hP勺造成急性肾衰(猫和SD大鼠) 【6、7一111。 对于三聚氰胺和三聚氰酸混合的亚慢性毒性研究还未见有报道，因此本研究通过对三聚氰胺和三聚 氰酸等量的混合物的亚慢性毒性试验，探讨三聚氰胺及其同系物三聚氰酸混合物对小鼠肾脏组织细胞的 影响，以期阐述肾毒作用机制，为进一步研究三聚氰胺对机体的危害提供实验依据。 1材料与方法 1．1动物分组及染毒 随机分成5组，每组20只，灌胃染毒，受试物为三聚氰 昆明种雄性小鼠，清洁级，体重20～309， 胺以及三聚氰酸，以蒸馏水溶解。各组剂量分别为对照组(蒸馏水)，三聚氰胺单独．组250 mg／kg·bw， ·作者简介：陈茜(1979．)，全日制在读硕士，研究方向：动物非传染性群发病。 ’+通讯作者：袁慧yuanhui7269@yahoo．COnLCll。 290蟋》2009年学术年会 三聚氰胺与三聚氰酸混合物(三聚氰胺+三聚氰酸等量混合)高、中、低剂量组分别为250 mg／kg·bw， 50 IIll，持续30d。 mg／kg．bw，10mg／kg．bw。隔天灌胃，每次0．5 1．2主要试剂与仪器 三聚氰胺、三聚氰酸(分析纯，购于北京国药集团化学试剂有限公司)，尿素氮测定试剂盒，肌酐 测定试剂盒，MDA试剂盒、SOD试剂盒、总蛋白测定试剂盒(南京建成生物有限公司)。电子天平(日 HistoStat 造)、UV-3802型紫外可见分光光度计、石蜡切片机(820 1．3检测样品处理 试验期问每天观察各组小鼠的情况，在灌胃后的第30天用颈椎脱臼处死各组试验动物，取每组试 验鼠的部分肾脏组织进行肾功能和肾组织细胞脂质过氧化等相关指标测定，取部分肾脏放于10％甲醛 溶液固定、用于病理组织学检查及细胞凋亡检测，小白鼠处死前摘眼球取血，血液放置离心机3500r／min 离心5rain、分离出血清，放置．20℃备用，待做生化指标的测定。 1．4相关指标检测 1．4．1血肌酐的测定肌酐与碱性苦味酸(比例为1：1)反应