PTEN通过AKT介导的细胞代谢途径抑制宫颈癌细胞的增殖.pdfVIP

第34卷第5期 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) V01．34 No．5 2013年 9月 JournalofXi’anJiaotongUniversity(M edicalSciences) Sep．2O13 ◇专题研究◇ PTEN通过AKT介导的细胞代谢途径 抑制宫颈癌细胞的增殖 陈昆仑 。，刘 莹 。，李明利 ，高艳娥 ，高 庆 (西安交通大学医学院：1．第二附属医院妇产科 ；2．第二附属医院干部病房 ，陕西西安 710004； 3．第一附属医院妇产科 。陕西西安 710061) 摘要 ：目的 研究PTEN基因与宫颈癌细胞增殖能力的关系，以探索 PTEN基 因在宫颈癌发生发展 中的可能作用及 其机制 。方法 Westernblot检测 PTEN基因在宫颈癌细胞系 HeLa、SiHa、C33A和CasKi中的表达 。利用脂质体法 将人工过表达 PTEN载体转染低表达 PTEN的宫颈癌细胞系 HeLa和 C33A，通过 MTT方法观察转染后 PTEN过 表达对宫颈癌细胞增殖的影响。采用多功能过程参数分析仪 ，检测转染 PTEN基 因后宫颈癌细胞培养基 中乳酸、葡 萄糖及谷氨酰胺的含量 ，观察 PTEN基因过表达对宫颈癌细胞代谢 的影响。Westernblot检测 PTEN过表达后宫颈 癌细胞 中丙酮酸激酶(PKM2)、6磷酸果糖激酶 2(PFKFB3)、谷氨酰胺酶 (GLS)、AKT和磷酸化 的AKT(pAKT)表达 情况 。结果 与正常宫颈上皮细胞相 比，PTEN基 因在 4种 宫颈癌细胞系中低表达 。与对 照组相 比，过表达 PTEN 的HeLa和 C33A细胞克隆中，PTEN基 因的水平明显升高 。细胞计数和 MTT法也显示 ，过表达 PTEN能够 明显抑 制肿瘤细胞 的增殖速率 (PO．05)；过表达 PTEN基因的细胞培养液 中葡萄糖及谷氨酰胺含量显著增多 ，但乳酸含量 减少 ；同时还发现 PTEN抑制 了AKT的磷酸化水平并使 PKM2、PFKFB3及 GLS的表达水平 降低 。结论 PTEN 基 因可通过 AKT途径调节细胞代谢 ，从而调节宫颈癌细胞 的增殖 。PTEN基 因有可能成为宫颈癌的诊断和治疗 的 新靶点 。 关键词 ：PTEN；宫颈癌 ；细胞代谢 ；AKT途径 ；丙酮酸激酶 ；6磷酸果糖激酶 2；谷氨酰胺酶 中图分类号 ：R33 文献标志码 ：A 文章编号：l671—8259(2013)05—0563—05 D0I：10．7652／idyxb201305002 PTEN inhibitsproliferationofcervicalcancercellsby AKT mediatedcellmetabolism CHEN Kun—lun ～，LIU Ying。，LIMing—li。GAO Yan—e ，GAO Qing (1．DepartmentofObstetricsandGynecology；2．GeneralSurgeonDepartmentofCadre’sward， theSecondAffiliatedHospital，MedicalSchoolofXi’anJiaotongUniversity，Xi’an710004； 3．DepartmentofObstetricsandGynecology，thefirstAffiliatedHospital， MedicalSchoolofXi’anJiaotongUniversity，Xi’an710061，China) ABSTRACT：Objective Toexploretherelatio