FTY720对大鼠急性脊髓损伤后神经功能恢复的影响及相关机制.pdfVIP

中国脊柱脊髓杂志2012年第22卷第4期 ChineseJournalof ineand印inalco ，2012，Vo1．22，No．4 339 FTY720对大鼠急性脊髓损伤后 神经功能恢复的影响及相关机制 杨 梁 ，吕德成 ，郑连杰 ，王朝晖 ，张 伟 ，李晓天 (1大连医科大学附属二院骨科 116027辽宁省大连市；2大连医科大学附属一院骨科 11601I辽宁省大连市； 3大连医科大学研究生院 116021辽宁省大连市) 【摘要】目的：观察n 720对大鼠急性脊髓损伤 (ASCI)后神经功能的影响，并探讨其相关机制。方法：168只 雌性 SD大 鼠，随机分成 A、B、C三组，每组 56只，A组 (假手术组)大 鼠麻醉后仅切除T9椎板 ，不打击脊髓 ，缝 合后立 即以0．3ml生理盐水灌 胃。B、C组采用 AllenS法制作 1、9脊髓损伤模型，B组 (对照组)以0．3ml生理盐 水灌 胃，C组 (治疗组)以兀Y720按 3mgk／g生理盐水稀释至 0．3ml灌 胃。每组取 8只大 鼠分别于术后 ld、3d、 7d、14d、21d行斜板试验及BBB评分。分别于术后 6h、12h、24h、48h、72h、7d、21d处死大鼠，每个时间点每组 8 只，取损伤段 (A组取相应部位)脊髓行超薄切片，HE染色观察各组脊髓坏死情况、炎细胞浸润情况、胶质瘢痕 形成情况及脊髓空洞大小．并计数各组术后 12h淋巴细胞数、术后 12h与 72h炎性细胞、术后 7d胶质瘢痕区 细胞 ，计算伤后 21d脊髓空洞面积与脊髓面积 比值 ；取术后 6h、12h、24h、72h的切片行 SP免疫组化染色观察 caspase一3表达及 Tunel染色观察细胞凋亡情况 ．计算相应时间点免疫组化染色阳性细胞 比值和凋亡指数 。所 有数据 以SPSS13．0进行统计学分析 。结果：B、C两组各时间点斜板实验及 BBB评分均较 A组 同时间点差 (P O．05)，在术后 1d时B、C组之间无显著性差异(P0．05)，术后 3d、7d、14d、21d时 C组优于B组 (P0．05)。HE染 色结果显示 A组各时间点脊髓形态正常；B、C组脊髓术后 6h可见脊髓 内出血、血肿形成 ，术后 12h一48h脊髓 进行性水肿 、损伤中心区出现液化坏死 ，伴有炎细胞浸润 ，以中性粒细胞、淋 巴细胞 、单核细胞为主 ，至术后 72h，损伤 中心区形成无组织结构空洞 ，空洞周围有大量炎细胞浸润 ，以小胶质细胞，单核细胞为主 ；术后 12h及 72h，B组炎细胞浸润程度明显重于 C组 (尸0．05)，术后 12hC组淋 巴细胞浸润程度相对 B组 明显减少 (P 0．05)，术后 7d，脊髓水肿减轻 ，空洞周 围形成胶质瘢痕，胶质瘢痕细胞计数 B组 明显大于 C组 (P0．05)，术后 21d脊髓空洞形成 ，脊髓空洞比值B组明显大于C组 (尸0．05)。SP免疫组化染色和Tunel染色结果显示A组 各时间点几乎见不到 caspase一3和细胞凋亡表达阳性细胞 ，B、C组脊髓损术后 6h即可见凋亡细胞 ，到术后 24h 达高峰，而后随术后时间延长而逐渐减弱，但是仍然保持在较高水平 ；caspase一3表达与细胞凋亡同步，各时间 点C组 caspase一3表达阳性细胞比值和细胞凋亡指数均显著低于B组 (P0．05)。结论：nY720可以显著改善 大 鼠ASCI后神经功能，其可能是通过抑制脊髓损伤后的炎症反应，减少 caspase一3的表达及神经细胞凋亡 ，从 而减轻脊髓继发性损伤 。 【关键词】急性脊髓损伤；FFY720；半胱氨酸蛋白酶一3；凋亡；大鼠 doi：10．3969／j．issn．1004-406X．2012．04．11 中图分类号 ：R683．2．R961 文献标识码 ：A 文章编号 ：1004—406X(2012)一04—0339—07 Effects and mechanism ofFTY720 Oilneurofunctionalrecovery after acute spinalcord injury in rats／YANG Liang， L Decheng， ZHENGLianjie