L-选择素与小鼠肝癌细胞Hepa1-6淋巴道转移的关系.pdfVIP

安 徽 医 药 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal 2013Jun；17(6) ·911· L-选择素与小鼠肝癌细胞 Hepa1．6淋巴道转移的关系 刘芯宇 ，张嘉宁 、 (1．国家康复辅具研究中心附属康复医院检验科，北京 100176；2．大连 医科大学生物 化学与分子生物学教研室，辽宁 大连 116027) 摘要：目的 研究L选·择素(L—selectin)与其配体甘露糖受体 (mannosereceptor，MR)问相互作用 小鼠Jj癌『细胞 Hepal-6淋 巴 道转移潜能相关性。方法 构建含有L-selectin的重组载体pcDNA3．1，转染小鼠肝癌细胞 Hepal一6，筛选稳定表达L-selectin的 细胞株。采用免疫组化 、RTP·CR、流式细胞、体外黏附试验技术研究小鼠肝癌细胞 Hepa1-6中L—selectin的表达及其与肿瘤细胞 淋巴道转移潜能的相关性。结果 1重组质粒为 目的基因L—selectin。2Hepal-6细胞表面有L—selectin表达，阳性率20．2％。3 流式细胞仪检测结果表明Hepal-6细胞表达L-selectin为 19．9％。4体外黏附试验结果表明，不具有转移特性的Hepal-6表达 L-selectin后可发生淋巴道转移 ，L-selectin能与MR结合(PO．001)，介导Hepal-6的淋巴道转移。结论 Hepal-6表达 目的基 因L—selectin后具有淋巴道转移潜能，并能与MR在体外结合 ，介导肿瘤细胞的淋巴道转移。 关键词 ：L一选择素；肿瘤转移；Hepal-6细胞 ；甘露糖受体 CorrelationbetweenL．selectin and lymphaticmetastasispotential ofmicehepa1．6cells LIU Xin_vu ，ZHANG Jia-ning。 (1．RehabilitationHospitalAffiliatedtoNationalResearchCenterforRehabilitationTechnicalAids，Befiing 100171，China； 2．DalianMedicalUniversity，Liaoning 116027，China) Abstract：Objective TostudythecorrelationbetweenL—selectinanditsligandmannosereceptorwithmicehepatomacellsHepal-6 lymphaticmetastaticpotentia1．Methods TherecombinantplasrnidspcDNA3．1containingL—selectinwasconstructed，andtransfected mouselivertumorHepal-6 cells．ThecellstrainswithastableexpressionofL-seleetinwerescreened．Immunochemistry．flow cytometric analysis，RT—PCRandotherprocedures，inadditiontoinvitroadhesionassayswereperformed，toverifytheexpressionofL—selectinon thesurfaceofHepal-6 cells，andtheinteractionsbetweenL—selectinandtumorcellslymphaticmetastasispotentialwasstudied．Results ThetargetgeneofrecombinantplasmidwasL—seleetin．L—selectinwasexpressedonHepal-6cell’ssurfacewiththepositiverateof