响应面法对酶水解谷朊粉制备生物活性肽的优化研究.pdfVIP

维普资讯 铷 饲料工 2005-No．5 CEREALFEEDINDUSTRY 响应面法对酶水解谷朊粉 制备生物活性肽的优化研究 蒲首丞 ，王金水 ，王亚平 (1．河南工业大学粮油食品学院，河南 郑州 450052；2．华南理工大学食品与生物工程学院，广东 广州 510640) 摘 要：以谷朊粉为原料，用复合蛋白酶水解，制备生物活性肽，并对其水解工艺进行优化。在单因素实验中，研究了时间、温 度、pH值、谷朊粉质量分数和酶浓度5种因素对水解度的影响。在此基础上以水解度、肽含量和还原力为响应值设计了4因 素(酶浓度、时间、温度和pH值)3水平的响应面实验。通过响应面实验得到最佳水解条件：时间3h、pH7．3、温度54℃、酶浓 度[E／S]是35mg／g和谷朊粉质量分数3％。此时水解度为7．5％，还原力达到最大值0．573，肽含量为0．148mg／na。结果表 明，谷朊粉的水解物——小麦肽具有抗氧化能力。 关键词：谷朊粉；复合蛋白酶；酶水解；抗氧化；响应面法；生物活性肽 中图分类号：TS201．2 5；TS201．1 文献标识码：A 文章编号：1003—6202(2005)05—0023—03 StudyonPreparationofBioactivePeptidesfrom Enzyme—HydrolyzedGlutenFlourbyResponseSurfaceMethod ABSTRACT：Inordertoobtaintl1ebioactivepeptides，theglutenflourwashydrolyzedbycomplexprotease。andtheconditionsofen． zymaticreactionwere d~erminedandoptimized．Theeffectsof time，temperature，pH value，qualityof utenflour nadenzymecon． centrationontl1edegreeofhydrolysis(DH)werestudiedinsinglefactortest．Onthisbasis，fourfactors(enzymeconcentration，time， temperatureandpHvalue)andthreelevelstestbyresponsesurfacemehtod(RSM)wered~signedfromDH，peptidecontentnadre— ducingcapacityas responsevalues．Throughhtetestof responsesurface，itWas foundhtathteoptimumconditionswere：time3h，pH 7．3，temperature54℃ ，enzymeconcenrtation35mg／gnadwheatglutenconcenrtation3％．Undertl1eseconditions，DH Was 7．5％ ， htereducingcapacityreachedmaximum0．573nadthepeptidecontentWas0．148mg／ra1．nleresultindicatedthatthehydrolysateof wheat utenhadhteantioxidationcapacity． KEYWORDS：glutenflour；complexprotease；hydrolysis：antioxidation；RSM；bioactivepeptide 生物活性肽有着独特的生理功能，目前制备生物活性肽 1．3 典型的蛋白酶酶解反应 的方法和途径有 3条：一是从 自然界的生物体中提取；二是 一 定浓度谷朊粉经加热预处理一段时间，然后将pH值 通过蛋白质降解途径获得；三是合成的方法，包括化学合成 调至适当值，再加入酶放入一定温度下的振荡水浴锅中反 法、酶合成法和重组DNA技术合成法…。从天然生物体提 应。以0．1mol／LNaOH滴定，保持pH值基本不变(士0．1)， 取活性肽，不仅含量很低，加工成本也很高，而且大量提取会 反应完后，在 IO0~C下灭酶 10min，然后进