多浪羊MHC-DRB1基因巢式PCR-RFLP多态性分析.pdfVIP

n {i：《s巷 8eedrq ·i蓁 露藕露 巢式PCR—RFLP多态性分析 中 红 ，杜迎春 ，贾 斌 ，陈玉林 ，彭林泽 (1．石河子大学动物科技学院，新疆石河子 832003； 2．西北农林科技大学动物科技学院，陕西西安 712100) 摘 要：应用巢式PCR—RFLP方法 ，对 200只 多浪羊的MHC—DRB外显予2的遗传 多态性进行检测 ，并对基 因型频率和等位基 因频率进行统计。结果表明：多浪羊的MHC—DRB基因外显子2在 SadI和MvaI的酶切位 点存在 多态性 ，分别检测出了2、2种等位基因，出现 了3、3种基 因型。由于MHC～DRB 为多碱基突变的基因 位点，综合 2种限制性 内切酶的酶切结果，在多浪羊中共发现 6种基 因型；平均杂合度和多态信息含量处于中 等多态程度，×适合性检验结果表明，多浪羊的MHC—DRB，外显子2在MvaI酶切位点达到Hardy—Weinberg 平衡 (P0．05)，但 5d(II酶切位点未达到Hardy—Weinberg平衡 (P0．O1)。 关键词 ：MHC—DRB；PCR—RFLP；多态性；多浪羊 中图分类号 ：$827．1 文献标识码：B 文章编号 ：0258—7033(2010)21—0009—04 新疆南部幅员辽阔，位于亚欧大陆中心 ，生态条 MHCⅡ类分子在免疫应答中起重要的调控作用，其多 件复杂而严酷。当地人民培育出了与本地区生态条件 态性集 中在 Ⅱ类 区域 的DR和 DQ亚区的基 因上 。 有极强适应能力的优 良地方家畜品种 ，其中新疆多浪 MHC1I类分子有很多基因，但只有 MHC—DR和 DQ 羊 (又称麦盖提大尾羊)以其肉质鲜嫩 、脂肪沉积均 亚区的DRB和DQB2个基因在蛋白质水平上表达， 匀 、抗逆 、抗病性强 、生长发育快等优 良特点现居首 其编码 的MHC抗原在其免疫系统中发挥重要的作 位 ，是在特殊的地理环境和气候条件下长期进化形成 用 ，该基因第 2外显子编码抗原的功能区(抗原结合 了抗逆性和抗病性强的稳定遗传性状的优 良绵羊品 区)，具有丰富的多态性 ，与抗原的多样性密切相关。 种。在新疆 ，不同地方绵羊品种对包虫病表现出不同 有研究报道 ，MHC基因与牛的乳房炎、口蹄疫、 的抵抗力 ，多浪羊因没有引入外来绵羊品种的遗传物 慢性脊椎轻瘫 、绵羊的锥虫病、线虫病等疾病的抗性 质，相对于其他引进品种包虫病发病率较低…，研究绵 和易感性相关_2。国内、外相关研究发现，MHC基因 羊遗传抗性、寻找具有抗性的遗传标记 ，从而进行标 与人的泡状棘球蚴病抗性或易感性可能相关 。本 记辅助选择抗病新品种不失为一新的研究途径 ，也将 研究应用优化 的巢式 PCR～RFLP方法 ，对多浪羊 在预防和控制该病方面具有非常重要的意义。 MHC—DRB基因外显子 2的遗传多态性进行初步检 绵羊的主要组织相容性复合体 (majorhistoeom— 测 ，目的是为今后新疆绵羊抗包虫病的育种工作打 patibilitycomplex，MHC)基因位于20号染色体上 ，是 下坚实基础 。 由紧密连锁 、高度多态的基因位点所组成的染色体上 1 材料与方法 的一个遗传区域 ，是参与机体免疫应答的主要基因。 这些紧密连锁的免疫应答基因编码的MHC分子与抗 1．1 实验动物 多浪羊来 自农三师44、45、50团二 原结合提呈给T细胞，控制着机体对抗原的识别和病 监区和50团三监区羊场，共采集 192只绵羊血液样 原体的免疫反应。绵羊的MHC分为 I、Ⅱ类和Ⅲ类。 品，颈静脉采血 10mL，分成 2管