链霉菌702菌株所产抗真菌单体组分DZP-8和DZP-9的分离纯化.pdfVIP

4 东农业科学 2011 年第 16 期 链霉菌702 菌株所产抗真菌单体组分DZP-8 和DZP-9 的分离纯化与制备 魏赛金 熊智强 张智平 涂晓嵘 何 建 涂国全 渊江西农业大学生物科学与工程学院 江西 南昌 330045冤 摘要 用乙醇浸提链霉菌 702 菌株发酵液,滤液真空浓缩成油状物 再用乙酸乙酯萃取,萃取液真空浓缩成浸膏, 浸膏通过硅 胶柱层析,以氯仿与甲醇不同配比进行梯度洗脱,收集含抗真菌活性物质馏分洗脱液 进行真空浓缩至干燥为抗真菌活性物质粗 品遥 粗品通过制备型 HPLC 仪进一步分离纯化,用乙腈颐水颐TFA 不同浓度进行梯度洗脱,按单组分保留时间收集不同馏分洗脱液,将 洗脱液冻干成抗真菌活性单体组分样品遥 抗菌活性和单组分样品纯度检测分别用管碟法检测对黑曲霉的抑菌活性和分析型 HPLC遥 结果表明 含抗真菌活性单位 10 000 mg/L 发酵液 200 L 经乙醇浸提液浓缩后得到含抗真菌活性单位 22 500 mg/L 的油状 物 80 L 浸提率为 90%;80 L 油状物经乙酸乙酯萃取浓缩得含抗真菌活性单位 120 000 mg/L 的12 L 浸膏 萃提率为 80%遥 500 g 浸 膏经硅胶柱层析, 获得含抗真菌活性单位达 750 mg/g 的粗品 48.0802 g遥 粗品经制备型 HPLC 仪获得纯度分别达到 99.47%和 90.28%的抗真菌单组分 DZP-8 和 DZP-9遥 关键词 链霉菌 702 曰 分离纯化曰 抗真菌单体组分曰 DZP-8曰 DZP-9 + 中图分类号 S482.2 8 文献标识码 A 文章编号 1004-874X渊2011冤16-0004-04 Isolation, purification and preparation of the antifungal monomer DZP-8 and DZP-9 from streptomyce 702 W EI Sai-jin , X IONG Zhi-qiang , ZHANG Zhi-ping, T U Xiao-rong, HE J ian, TU Guo-quan 渊Biological science and engineering college of Jiangxi agriculture unive rs ity Nanchang 330045 China冤 Abstract 院From a large-scale fermentation of Streptomyces spp.702 , mycelium was extracted from the culture filtrate. Filtration was concentrated under reduced pressure to a brown gum. The brown gum was partitioned in AcOEt. The combined extracts were concentrated under reduced pressure.The AcOEt extract was mixed on silica gel and fractionated through flash chromatography eluting with a gradient mixture of chloroform -methanol giving