补肾中药对下丘脑gnrh, 垂体fsh, lh 及成骨细胞bgp 基因表达的调适作用.pdfVIP

维普资讯 中医杂志 2002年3月第43卷第3盟 补肾中药对下丘脑 GnRH、垂体FSH、LH及成骨细胞 BGP基因表达的调节作用 蔡德培 张 炜。 摘要 目的：探讨补 肾中药对下丘脑促性腺激 素释放激素 泻火或益肾填精中药后，下丘脑GnRH、腺垂体FSH、 (GnRH)、腺垂体促性腺激素卵泡刺激素 (FSH)、黄体生成素 LH及成骨细胞 BGP的mRNA表选水平的变化 ． (LH)及成骨细胞骨钙素 (BGP)基因表达的调节作用。方法 ：采 探讨补肾中药对相应的基因表选的影响。 用定量的逆转录一聚合酶链式反应 (定量的RT—PCR)方法， l 材料与方法 观察青春期大 白鼠喂饲滋明泻火或益肾填精中药后，下丘脑 1．1 实验动物及分组：同窝的SD种雌性大 白鼠，1月 GnRH、腺垂体 FSH、LH及成骨细胞BGP的信使棱糖 棱酸 龄，体重 18o～190g(相当于青春期)，共 3O只，分为 3 (mRNA)表达水平的变化。结果：滋明泻火药可使下丘脑 组 ，每组 10只。对照组喂饲生理盐水 ，滋阴泻火药组喂 GnRH、腺垂体FSH、LH及成骨细胞 BGp的mRNA表达水平 显著下调，而益肾填精药可使下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH 饲滋阴泻火中药合剂，益肾填精药组喂饲益肾填精中 及成骨细胞BGP的mRNA表达水平显著上谓。结论 ：说明补 药合剂。 肾中药可在转录水平谓节下丘脑GnRH、腺垂体FSH、LH及成 1．2 补肾中药及剂量：滋阴泻火中药方由生地黄、炙 骨细胞 BGP基因表达，这可能是补肾中药调整性早熟患儿青 龟 甲、黄柏、知母等组成；益肾填精中药方由熟地黄、龟 春发育进程和改善骨骼发育的主要作用机理之一。 甲胶、淫羊藿、鹿角胶等组成。由本院中药制齐4室煎制 主■词 基因表达 ／药物作用 补肾药 ／药理学 下丘脑一体 成浓缩合剂，每毫升约合生药 3g，每次每只大鼠用灌 垂系统 ／药物作用 胃法喂饲 5ml，每 日1次 疗程 2个月 1．3 实验室方法；各种mRNA的表达水平采用定量 真性特发性性早熟患儿的下丘脑一垂体一性腺轴 的RT--PCR方法测定 提前发动、功能亢进，血清促性腺激素卵泡刺激素 1．3．1 标本制备：疗程完成时，将各组大鼠处死，立即 (FsH)、黄体生成素(LH)水平显著升高。患儿的骨骼 断头取出下丘脑及垂体，同时截取包括骨骺软骨在内 往往生长加速、成熟提前，成骨细胞的功能活动显著亢 的一段后肢骨关节 。标本置于一85c冰箱保存 进，血清骨钙素(BGP)水平明显升高，临床上采用滋肾 1．3．2 总mRNA的提取：下丘脑及垂体组织经脱脂 ， 阴泻相火中药 (以下简称滋阴泻火药)可使其下丘脑一 制成匀浆，然后提取总 RNA．再经 OligdT柱纯化 垂体一性腺轴的功能亢进显著缓解，血清FSH、LH下 mRNA后，260nm 比色定量。骨骺软骨经肌肉消化液 降，同时其成骨细胞过度亢进的功能活动被明显抑制， 及裂解渡处理后，提取总RNA，再经OligdT柱纯化 血清BGP水平下降。当患儿到达正常青春期年龄后， mRNA，然后用紫外光