离子液体双水相系统萃取分离牛血清白蛋白.pdfVIP

第#, 卷 分析化学 （+E:RS .G2RGE ）! 研究简报 第% 期 ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ! %%7 年% 月 KD*ATIT @;UNABJ ;V 2ABJWC*XBJ KDT)*ICNW ,$ 8 ,$# 离子液体双水相体系萃取分离牛血清白蛋白 # 邓凡政 ! 郭东方 （淮北煤炭师范学院化学系，淮北#$%%% ） 摘! 要! 建立了由亲水性离子液体四氟硼酸’ 甲基’#’丁基咪唑（［()*) ］(+ ）和-. /0 形成的双水相体系 , , 萃取分离牛血清白蛋白（(12 ）的新方法。研究了不同盐及盐的浓度、离子液体浓度以及蛋白质用量、溶液酸 度、其它共存物质对双水相成相及(12 萃取率的影响，结果表明，磷酸二氢钾盐浓度为3% 45 6 ，离子液体浓度 在7% 8 ,% )65 6 ，(12 的浓度为#% 8 $% )45 6 ，溶液酸度在9. , 8 3 范围，离子液体双水相体系对(12 有较 高的萃取率。用加入不同类型表面活性剂探讨了离子液体与蛋白质之间的作用。 关键词! 离子液体，双水相，牛血清白蛋白，萃取分离 ! 引 言 离子液体是在室温或室温附近由离子构成呈液态的物质，具有优异的化学热力学稳定性，其液态温 度区间大、溶解范围广、没有显著的蒸气压以及极性较强且酸性可调等优点。因此，它是一种极具吸引 力的绿色溶剂，被称为环境友好液体、“可设计性”溶剂，是传统挥发性有机溶剂的理想替代品［］。近年 ［ ］ 来，离子液体也被用于萃取分离领域，@;ABCDBA 等 以甲基咪唑类离子液体作为萃取剂对多种有机物进 行了萃取，离子液体还用于生物技术中的分离提取，如从生物燃料2(E 的发酵液中回收丁醇［# ］；顾彦 ［, ］ ［$ ］ 龙等 利用室温离子液体浸取分离牛磺酸与硫酸钠固体混合物；刘庆芬等 利用离子液体双水相体系 对青霉素进行分离。而利用该体系对于蛋白质萃取分离的报道还较少见。为了扩大该领域应用范围， 本研究用亲水性离子液体 ［()*) ］(+ 和磷酸二氢钾，形成上相富集离子液体和下相富集磷酸盐的双水 , 相体系对牛血清白蛋白进行萃取研究。结果表明，该离子液体双水相体系，对牛血清白蛋白有较高的萃 取率，为提纯分离蛋白质，提供一种新的方法。 # 实验部分 # ! 仪器与试剂 FG’?% 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；H 型可见分光光度计（上海 9.I’# 型精密酸度计（上海雷磁仪器厂）。 光谱仪器有限公司）； 牛血清白蛋白（ ［7 ，H ］ (12 ）溶液：%% )45 6 ；［()*) ］(+ 按文献方法制备 ，称取# , 4 !’ 甲基咪唑溶 , 解在$ )6 甲苯中，然后向其中滴加溴代正丁烷，加热温和回流 8 # D 后，加水分层除去大部分溶剂， 再经过减压蒸馏除去残留的溶剂和未反应的原料，得红棕色粘稠状物体。将:B(+ （# ? 4 ）溶于3%