转化人胚肌腱细胞的体外培育及生物学特性研究.pdfVIP

中国修复重建外科杂志 1999年第 13 卷第 2 期 ·99 · ·组织工程 · 转化人胚肌腱细胞的体外培养及 生物学特性研究 1 1 1 2 2 杨志明 　解慧琪 　项 　舟 　李胜富 　魏启欧 　　【摘 　要】　　目的　研究经 ptsA58H 质粒转化的人胚肌腱细胞的生物学特性 ,探讨细胞生长 特性与体外培养条件改变的关系 。方法 　取人胚肌腱细胞和经 ptsA58H 质粒转化的人胚肌腱细 胞 ,进行体外培养 。对细胞进行形态学 、超微结构及一般特征的观察 。在不同培养条件下进行生 长曲线绘制 ,平板克隆实验和软琼脂培养以及免疫组织化学法胶原染色 。结果 　在正常培养条件 下 ,人胚肌腱细胞和转化人胚肌腱细胞的生长性状几乎无差异 ,且冻存复苏并不改变其生长特性 。 在 39.5 ℃及 35 ℃进行条件培养 ,转化细胞的生长特性发生改变 。转化细胞能长期传代 ,增殖能力 强 ,并存在接触抑制现象和血清营养依赖性 ,在软琼脂中不能生长 ,具有分泌 Ⅰ型胶原的能力 。结 论 　经 ptsA58H 质粒转化的人胚肌腱细胞可长期连续传代 。通过改变培养条件可控制其生长 。 无肿瘤细胞的生物学特点 。可作为组织工程化肌腱的标准细胞 。 【关键词】　　人胚肌腱细胞 　　转化细胞 　　体外培养 　　生物学特性 CULTUREOFTHETRANSFORMEDHUMANEMBRYONICTENDONCELLSANDITSBIOLOGI CALCHARACTERISTICSINVITRO YANG Zhiming , XIE Huiqi , XIANG Zhou , et al . Department of OrthopedicSurgery , First UniversityHospital , West China Universityof Medical Sciences. Chengdu Sichuan , P . R . China 610041.E mail:orthop@public.cd.sc.cn 【Abstract】　　Objective　Thispaperwastostudythebiologicalcharacteristicsofthetransformedhu manembryonictendoncells,therelationbetweencellgrowthandcultureconditions,andtocomparethesefea tureswiththatofhumanembryonictendoncells. Methods　 TheptsA58Hplasmidhadsuccessfullyusedto transformatendoncelllinefromhumanembryoinourpastwork.Thehumanembryonictendoncellsandthe transformedhumanembryonictendoncellswerecultured in vitro. Indifferentcultureconditions,thegrowth curveweredrawnrespectively.Populationdependenceandproliferationcapabilityofthecellswereinvestigated throughplatecloningtestandsoftagarculture.Thecollagensecretedbycells