基于HPLC-MS_MS的闷黄时间和泡茶时间对藤茶中NAD+前体含量的影响分析.pdfVIP

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2025年1月第27卷第1期中国现代中药ModChinMedJan.2025Vol.27No.1

·基础研究·

基于HPLC-MS/MS的闷黄时间和泡茶时间对藤茶中

+△

NAD前体含量的影响分析

**

吴佩玲,戚舜尧,何国浩,许利嘉,肖培根

中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所,北京100193

[摘要]目的:建立高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定藤茶Ampelopsisgrossedentata(Hand.

+

Mazz.)W.T.Wang中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)及其前体化合物色氨酸(TRY)、烟酸(NA)、烟酰胺

+

(NAM)、烟酰胺单核苷酸(NMN)和烟酰胺核苷(NR)的含量,探究闷黄时间和泡茶时间对藤茶中NAD前体含

量的影响。方法:采用HSST3色谱柱(100mm×2.1mm,1.7µm);以乙腈(A)-含0.2%甲酸和0.01mol·L–1甲

酸铵的水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为0.4mL·min–1;柱温为35℃;进样量为2µL;电喷雾离子源,多

反应监测模式。对提取溶剂的组成进行了优化,以水-甲醇(1∶1)提取效率最高。结果:所开发的方法线性关系良

好,r均大于0.999,定量限为0.02~15.00ng·mL–1;加样回收率为94%~101%,加样回收率RSD为2.5%~7.3%,

精密度、基质效应、准确度和稳定性均符合定量分析的要求。对不同闷黄时间(3、4、5、6h)、不同提取时间(90℃

++

提取30、60min)、不同部位(茎和叶)的藤茶样品中NAD前体含量进行测定,结果表明藤茶含有丰富的NAD前体,

+

NA、NR、NMN、NAM、NAD、TRY质量分数分别为(2.27±0.02)、(3.19±0.12)、(3.02±0.15)、(7.98±0.45)、

–1+

(124.58±7.23)、(259.00±10.00)µg·g;随着闷黄时间的增加,NA、NR、NMN和NAD含量有减少的趋势,

NAM和TRY含量有增加的趋势;与泡茶30min组比较,泡茶60min组的NAM显著增多,NMN显著减少。NAD+

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