全血胆碱脂酶测定.pptVIP

第1页，共24页，星期日，2025年，2月5日有机磷农药的简单回顾全血胆碱酯酶活性测定概述三氯化铁比色法第2页，共24页，星期日，2025年，2月5日有机磷农药

organophosphorouspesticide第3页，共24页，星期日，2025年，2月5日接触机会生产第4页，共24页，星期日，2025年，2月5日施用第5页，共24页，星期日，2025年，2月5日食物第6页，共24页，星期日，2025年，2月5日误服、自杀第7页，共24页，星期日，2025年，2月5日毒作用机制抑制体内胆碱酯酶（ChE）活性使体内乙酰胆碱大量积聚，引发神经系统功能紊乱乙酰胆碱胆碱酯酶有机磷农药第8页，共24页，星期日，2025年，2月5日诊断《职业急性有机磷杀虫剂中毒诊断标准》(GBZ-2002)职业史现场职业卫生调查临床症状体征实验室检查——全血胆碱酯酶（ChE）活性第9页，共24页，星期日，2025年，2月5日诊断分级标准全血ChE活性范围急性轻度中毒---50%-70%急性中度中毒---30%-50%急性重度中毒---30%以下第10页，共24页，星期日，2025年，2月5日实验目的加深对有机磷农药中毒机制的认识掌握全血ChE活性测定的意义掌握全血ChE活性测定原理、方法第11页，共24页，星期日，2025年，2月5日意义有机磷农药中毒的重要诊断指标中毒者治疗后的效果观察指标接触有机磷农药人员健康状况的动态观察指标第12页，共24页，星期日，2025年，2月5日方法Asch-DTNB比色法（GBZ52）三氯化铁比色法溴麝香草酚蓝（B·T·B）比色法纸片法Biocheck法（便携式分析仪）第13页，共24页，星期日，2025年，2月5日三氯化铁比色法[原理]乙酰胆碱胆碱酯酶胆碱+乙酸碱性羟胺乙酰羟胺HClFeCl3羟肟酸铁(棕红色络合物)第14页，共24页，星期日，2025年，2月5日[器材]刺针一次性自控式微量吸管（20μl）分光光度计恒温水浴箱（37℃±0.5℃）第15页，共24页，星期日，2025年，2月5日[试剂]磷酸盐缓冲液（PH=7.20）碱性羟胺溶液1∶2盐酸溶液10%三氯化铁溶液乙酰胆碱标准应用液（1ml含4μmol）第16页，共24页，星期日，2025年，2月5日[分析步骤]1.乙酰胆碱标准曲线的绘制2.样品测定第17页，共24页，星期日，2025年，2月5日1.乙酰胆碱标准曲线的绘制（1）取六只具塞试管，配制乙酰胆碱标准色列管号123456乙酰胆碱标准应用液（ml）00.20.40.60.81.0水（ml）111111磷酸盐缓冲液（ml）10.80.60.40.20乙酰胆碱含量（μmol）00.81.62.43.24.0第18页，共24页，星期日，2025年，2月5日（2）各管加碱性羟胺4ml，立即振摇3min（3）各管加1∶2盐酸溶液2ml，振摇1min（4）各管加10%三氯化铁溶液2ml，摇匀，过滤（5）测吸光度：λ——520nm，参比管——第1管（6）绘制标准曲线第19页，共24页，星期日，2025年，2月5日2.样品测定A管（样品管）B管（对照管）0.98ml磷缓0.98ml磷缓20ul血20ul血37℃水浴5min碱性羟胺4ml,振3min乙酰胆碱标准应用液1ml乙酰胆碱标准应用液1ml37℃水浴30min碱性羟胺4ml,振3min1∶2盐酸溶液2ml,摇1min10%三氯化铁溶液2ml摇匀、过滤、比色第20页，共24页，星期日，2025年，2月5日经皮肤侵入机体：有机磷农药污染皮肤粘膜，经无损伤处进入体内。由于它是脂溶性的，能溶解在油脂中，当皮肤破溃时更易进入。(2)经呼吸道进入机体：农药喷雾剂可经呼吸道粘膜进入体内。)经消化道进入机体为自服、误服或吃被污染的食物(蔬菜、水果、粮食)。对于职业性的中毒,我国有专门的诊断标准,其中ChEAsch-DTNB（硫代乙酰胆碱-联硫代双硝基苯甲酸）比色法（GBZ52）职业性急性有机磷杀虫剂中毒诊断标准DiagnosticCriteriaofOccupationalAcuteOrganophosphorusInsecticidesPoisoning（GBZ8-2002）中有说明：血液胆碱酯酶活性的检验有硫代乙酰胆碱-二硫双硝基苯甲酸法(GBZ52)、