标准病理组织制片和染色技术.pptVIP

预先把苏木素溶于无水酒精中配制时，取一三角瓶倒入蒸镏水，再加入钾明矾，于电炉上加热至90℃左右时，拔去电源加入酒精苏木素，再插上电源继续加热，持续3~5分钟，拔去电源，加入氧化汞，此时可产生大量的气泡，应防止其溢出瓶外。再继续通电加热，煮沸后持续3~5分钟，此时溶液表面看呈深紫黑色，即可撤离电源，用备好的冰凉水，将烧瓶迅速的插入水中，让染液迅速冷却，中止氧化放入暗处。于第二天过滤后再加入冰醋酸，即可使用，染色时间5－15分钟。第62页，共119页，星期日，2025年，2月5日（2）Mayer氏苏木素（Mayer,1903）苏木素0.1g蒸镏水100ml钾明矾5g柠檬酸0.1g水合醛5g碘酸钠20mg第63页，共119页，星期日，2025年，2月5日将蒸包馏水稍为加温，加入苏木素不停地搅拌直至溶解，再加入钾明矾，令其溶解后再加入碘酸钠过滤后即可使用，染色时间10－20分钟，如果先用天表蓝为媒染剂，染色时可在2－3分钟。第64页，共119页，星期日，2025年，2月5日配制苏木素的注意事项1、苏木素可以配成5%或10%，让其氧化产生苏木红，然后根椐每次配制溶液的量，再决定加入多少。2、在配制苏木素时，三角烧瓶的选择也很重要，例如，配制500ml的溶液，应选用1500－2000ml的三角烧瓶，配制1000ml则可选3000ml的烧瓶，这样溶液在加入氧化汞时，才不会喷出瓶外。第65页，共119页，星期日，2025年，2月5日3、冰醋酸一定要在溶液过滤后加入如果过滤前加入，则在过滤时溶液很难通过滤纸，这主要是冰醋酸草可造成对滤纸的损害。第66页，共119页，星期日，2025年，2月5日(二）伊红的配制1、1%伊红洒精的配制伊红（水溶）5g70%-75%酒精500ml取少许蒸馏水来溶解伊红或称曙红，当完全溶解后，再加入酒精，然后再加入少许冰醋酸，此时溶液即可变为鲜红色。注意：冰醋酸一定要加进去如果没有加入冰醋酸，细胞浆将难以染得鲜艳。第67页，共119页，星期日，2025年，2月5日2.切片染完苏木素后的分化，应该如何控制和注意什么问题？（1）分化液中盐酸不能高于1%，否则会因分化过强而将已着色的颜色大部分脱水，造成染色过浅。（2）对各种组织应视情况而定，如淋巴结的切片，应分化较长时间等。（3）分化完后，应在显微镜下观察，如发现核中的物质不清楚，则应继续分化至清晰为止。（4）要认真操作，细心观察，不断总结。第68页，共119页，星期日，2025年，2月5日胃类癌（瘤细胞小而一致）第69页，共119页，星期日，2025年，2月5日瘤细胞的多形性第70页，共119页，星期日，2025年，2月5日病理性核分裂像第71页，共119页，星期日，2025年，2月5日平滑肌、平滑肌瘤和平滑肌肉瘤第72页，共119页，星期日，2025年，2月5日大肠腺体、腺瘤和腺癌第73页，共119页，星期日，2025年，2月5日正常鳞状上皮、乳头状瘤和鳞状细胞癌第74页，共119页，星期日，2025年，2月5日淋巴管转移癌第75页，共119页，星期日，2025年，2月5日肺淋巴管转移癌第76页，共119页，星期日，2025年，2月5日冰冻切片第77页，共119页，星期日，2025年，2月5日一、种类：1、低温恒冷箱切片法2、二氧化碳冰冻切片法3、甲醇循环制冷冰冻切片法4、半导体冰冻切片法5、氯乙烷冰冻切片法第78页，共119页，星期日，2025年，2月5日二、冰冻切片的目的1、在手术进行中。突然发现病人的病变与原诊断不相符合或者怀疑时需要病理给予确定。2、了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞或者转移的程度，以利于确定以后的治疗措施。第79页，共119页，星期日，2025年，2月5日3、对于已确定恶性肿瘤的病人则需要了解其手术范围是否足够，上下切缘是否有残存的肿瘤细胞。4、在剖腹探查所发现的肿块。5、显示组织中的脂肪类物质。6、某些酶的显示如ATP酶琥珀酸脱氢酶等。7、神经病理学中的某些染色法。8、对某些物质所进行的免疫荧光的研究。第80页，共119页，星期日，2025年，2月5日三、冰冻切片的操作（1）本室现有Shandon-AS620E型冷冻切片机的主要性能。左边的切片台可达到-60左右，冷冻箱内在0～-30间可任意调节，箱面上有电子控制板，装有急速冷冻，即放上标本启动该键机器马上进行冷冻工作并持续10分