肿瘤个体化分子病理检测及其临床应用.ppt

第1页，共30页，星期日，2025年，2月5日肿瘤个体化分子病理检测及临床应用一、开展肿瘤个体化分子病理检测的意义二、分子病理检测的标本选择三、分子病理检测的方法四、分子病理检测的项目第2页，共30页，星期日，2025年，2月5日一.开展肿瘤个体化分子检测的意义--个体化分子诊断是个体化治疗的基石。--靶向治疗是为攻击特异性靶分子而设计，所以用药前，必需检测患者是否存在对应的靶点，才能发挥其疗效。第3页，共30页，星期日，2025年，2月5日卫生部原发性肺癌诊疗规范(2011)-------IV期肺癌在开始治疗前，建议先获取肿瘤组织进行表皮生长因子受体(EGFR)是否突变的检测，根据EGFR突变状况制定相应的治疗策略。第4页，共30页，星期日，2025年，2月5日中国肿瘤界正在致力于推动肿瘤个体化分子病理诊断的规范化，同时也希望临床能够与病理科紧密配合，共同实现规范化诊断、规范化治疗的目标，以造福患者。第5页，共30页，星期日，2025年，2月5日外科手术标本(石蜡切片）10umX2切片活检标本（石蜡切片）10umX4切片穿刺标本（新鲜组织）至少芝麻粒大小胸腹水标本不少于10mL。二.分子病理检测的标本选择第6页，共30页，星期日，2025年，2月5日--尽量避开肿瘤间质、出血灶、坏死物质等--肿瘤细胞所占的比例也是必须要考虑的因素。--目前尚不清楚满足分子学检测需要的最低限度肿瘤细胞的数量。第7页，共30页，星期日，2025年，2月5日--获得质、量俱佳的肿瘤标本是EGFR检测的重要前提条件，涉及到从临床标本采集到完成最终检测实验等多个环节。--离体后及时（30分钟内）固定于10%中性缓冲福尔马林液中。--固定时间：小标本6-12h，大标本6-48h。第8页，共30页，星期日，2025年，2月5日肿瘤组织标本病理学评估组织切片非小细胞性肺癌诊断及病理类型足够的肿瘤细胞比例：测序法，至少50%肿瘤细胞；ARMS法，至少2%的肿瘤细胞(不考虑遗传异质性)足够多的肿瘤细胞总数：200个肿瘤细胞标识肿瘤丰富的区域富集肿瘤细胞取一张切片HE染色用于病理评估其余白片用于提取DNA建议切片数量：—手术标本，5μm×5—小活检标本，5μm×10固定包埋组织手术标本：可得足量肿瘤DNA，但DNA片段化小活检标本：可得肿瘤DNA量少且片段化新鲜/冰冻组织手术标本：最好标本，可得高质量肿瘤DNA小活检标本：量少，但肿瘤DNA质量仍好肿瘤组织样本的采集及病理评估PirkerR,etal.JThoracOncol2010;5(10):1706-1713.第9页，共30页，星期日，2025年，2月5日1.Dataonfile.2.KimuraH,etal.BritishJournalofCancer2006;95(10):1390-1395.3.ZhangX,etal.LungCancer2008;60(2):175-182.4.SohJ,etal.IntJCancer2006;119(10):2353-2358.胸水标本处理流程收集胸水50-500ml室温1000转离心10分钟，吸去上清沉淀物-80℃保存沉淀物均匀涂玻片室温晾干涂片涂片区域滴加75%酒精室温晾干涂片常温运输涂片沉淀物用棉絮纸包裹0.1%水性伊红漂染1秒10%中性福尔马林固定24-48小时后续处理与组织标本相同低温保存酒精固定涂片福尔马林固定切片第10页，共30页，星期日，2025年，2月5日三.分子病理检测的方法基因试剂盒价格适中、灵敏度，特异性高、所需时间短。PCR通用设备平台基因芯片特定设备，价格高测序法检测PCR通用设备平台，灵敏度，特异性低、所需时间长。价格便宜第11页，共30页，星期日，2025年，2月5日（一）技术简介肿瘤个体化治疗是指实施治疗前根据患者的个体差异（基因差异），“量体裁衣”（基因检测）地制定某个患者的治疗方案，即检查某种靶向药物对患者是否有效或是在多种化疗药物中筛选最有效的药物。化疗个体化可显著提高治疗效果，有效缓解疾病，避免药物的毒副作用，提高患者的生活质量，避免因反复尝试不同药物带来的身体损害、错过最佳治疗时间以及浪费金钱。使用靶向药物前必须基因检测，从而判断该药是否适用该患者。第12页，共30页，星期日，2025年，2月5日荧光定量PCR与基因测序法检测基因突变