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仪器分析紫外-可见分光光度法(三)凌悦菲仪器分析Contents目1光度法分析中的显/褪色反应2判断波长3光度法的运用录试判定A和B分别为何种素?P.叶绿素a、叶绿素bQ.类胡萝卜素、叶绿素C.叶黄素、叶绿素aD.叶绿素、类胡萝卜素解析:叶黄素的最大吸收波长446nm类胡萝卜素的最大吸收波长449nm叶绿素a在645nm和663nm处均有吸收,645nm处吸光系数较小为16.75,在663nm处较大,为82.04;叶绿素b在645nm和663nm处亦都有吸收,但在645nm处吸光系数较大,为45.60,在663nm处较小,为9.27.叶绿素a的吸收峰值出现在663nm处,该吸收曲线延伸到645nm处,在此波长处的吸收系数不如在663nm处大,因此在计算公式中求算叶绿素a的含量时,需扣除叶绿素b在663nm和645nm处的吸光度值,再进行计算.(吸光度A具有加和性)参比溶液的选择:根据测定体系的具体构成及要求而定吸光度A的范围:0.2-0.8较合理
(避免数值本身过大或过小其偏差对测定的准确性影响)应用邻菲罗林(phen)-Fe2+显色反应思考:抗坏血酸的作用?反应体系为何选择弱酸性?《精细化工技术资源库建设》系列课程感谢观看仪器分析紫外-可见分光光度法(三)
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