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①煮沸消毒法:温度在100℃左右,3-5min杀灭繁殖体,芽胞煮沸3h以上。若在水中加入2-5%酚,则10-15min可杀灭芽胞;灭菌对象:饮水、玻璃器皿、外科器械(3)高温消毒*第62页,共91页,星期日,2025年,2月5日指利用不太高的温度,杀死食品中的病原菌及一般杂菌,同时又不致严重损害营养物质和风味的消毒方法。牛奶(酒类)常用此法杀死其中的结核杆菌或巴氏杆菌。方法有3:一是61.1-62.8℃,15-30min。二是71.7℃,15-30s。三是96℃,6S②巴氏消毒法:如将牛奶等食品在140℃左右保留3~4s,然后急剧冷却至75℃,再经匀质后冷却至20℃,可使食品保存6个月。*第63页,共91页,星期日,2025年,2月5日只有反复结冰和解冻,才会使细胞受到破坏而死亡。在低温条件下,微生物的生命活动大大受阻,进入休眠状态,只能维持生命。酶活性降低,导致代谢、遗传普遍停滞;膜细胞流动性变差。在低温下休眠的微生物,一旦获得适宜温度,即可恢复活性。低温不易引起蛋白质的变性,不易使微生物死亡低温的影响嗜中温菌一般在5℃以下处于休眠状态,因此通常实验室用冰箱的4℃冷藏温度保藏细菌。*第64页,共91页,星期日,2025年,2月5日二、pH值大多数微生物最适环境pH为6.5~7.5,可生存的pH范围在4~10之间,细菌一般要求中性和偏碱性的环境。各种工业废水的pH不同,通常在6~9之间,个别偏高或偏低,可用本厂的废酸或废碱性水加以调节,因此通常设前调节池,维持曝气池的pH=7左右。*第65页,共91页,星期日,2025年,2月5日在微生物培养过程中,随着微生物的生长繁殖和代谢活动的进行,培养基的pH值会发生变化:缓冲液外加调节:直接加酸、碱(工业适用)pH值为6.8KH2PO4K2HPO4事实上,净化污(废)水的微生物适应pH变化的能力比较强,好氧处理pH在6.5~8.5均可不加调节。厌氧处理pH在6.6~7.6。*第66页,共91页,星期日,2025年,2月5日三氧化还原电位(Eh值)V氧化还原电位与氧气多少有关:成正比。氧气含量高,Eh值高;氧气含量低,Eh值低。*第67页,共91页,星期日,2025年,2月5日活性污泥法系统:Eh值+200~+600mv之间低于这一范围说明水中溶解氧过少,需加大曝气力度。污泥消化法系统:Eh值-100~-200mv之间,超过上限则表示溶解氧浓度过高,将不利于厌氧细菌的生长,应改进工艺降低水中溶解氧量。*第68页,共91页,星期日,2025年,2月5日根据氧与微生物生长的关系可将微生物分为好氧微好氧耐氧型兼性厌氧专性厌氧微生物类型最适生长的O2体积分数好氧微好氧氧的忍耐型兼性厌氧专性厌氧等于或大于20%2%一l0%2%以下有氧或无氧不需要氧、有氧时死亡四、溶解氧*第69页,共91页,星期日,2025年,2月5日2.计数器(血球计数板)测定法*第30页,共91页,星期日,2025年,2月5日*第31页,共91页,星期日,2025年,2月5日0.1ml菌液第32页,共91页,星期日,2025年,2月5日提问:数了100个小格中有90个细菌,样品中的细菌浓度是多少?(90个÷100)*400/0.1ml=3600个/ml适用范围:测定个体较大微生物细菌个体若太小、过多,由于每一小格中细菌层层叠加,相互遮挡,难以准确计数。数数细菌(或其他微生物或细胞)数目,(一般数100个小格),折算样品细菌浓度;*第33页,共91页,星期日,2025年,2月5日3.比例计数法比例—样品菌液与等体积的血液混合,观测二者比例红血球数已知(男性400~500万个/ml,女性350~450万个/ml),平均400万个/ml问:如果平均每个视野中细菌数量/红血球的数量比例为5.5:1,则细菌数量=?5.5×400万个/ml=2.2×107个/mL样品红血球细菌*第34页,共91页,星期日,2025年,2月5日浊——细菌悬浮液的浊度。细菌不完全透光,一定范围内菌溶液的混浊度与菌数量成正比4.比浊计数法采用这种方法时,为了得到实际的细胞绝对含量,通常须将已知细胞浓度的样品按上述测定程序制成标准曲线,然后根据透光度或光密度值从标准曲线中直接查得细菌含量。*第35页,共91页,星期日,2025年,2月5日(1)制标准曲线(OD~No)(2)测菌液浊度,查图表得出细菌数量浊度仪或721分光光度仪第36页,共91页,星期日,2025
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