掌握硫酸铵分级盐析的基本操作技术原理课件.pptxVIP

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第四章沉淀分离技术;盐析

有机溶剂沉析

等电点沉析

有机聚合物沉析

其他沉析技术;一、盐析;影响盐析的因素;(二)生物分子种类

生物分子的分子结构不同,其分子表面亲水基

团与疏水基团不相同,不同生物分子产生盐析现象所需中性盐的浓度(离子强度)亦不同。

(三)生物分子浓度

溶液中生物分子的浓度对盐析的效果有很大的

影响,要得到理想的沉析效果,必须将生物分子的浓度控制在一定的范围内。一般对于蛋白质溶液,其浓度为2%~3%比较合适。;(四)pH值

在盐析时,如果要沉析某一成分,应将溶液的pH值调整到该成分的等电点,如果希望

某一成分保留在溶液中不析出,则应使溶液的pH值偏离该成分的等电点。

(五)温度

多数物质的溶解度会受温度变化的影响。;盐析的操作与应用;3、盐析操作注意事项

盐析反应完全需要一定时间,一般硫酸铵全部加完后,应放置30min以上才可进行固-

液分离。

经过一次分级得到的盐析沉淀,能否进

行第二次盐析要靠试验确定。

盐析操作时加入盐的纯度、加量、加入方法、搅拌的速度、温度及pH等参数应严格控

制。;盐析时生物分子浓度要合适,应充分考虑共沉及稀释后收率、盐量和固-液分离等问题。一般低浓度硫酸铵可采用离心分离,高浓度硫酸铵常用过滤方法,因为高浓度硫酸铵密度太大,要使蛋白质完全沉降下来需要较高的离心速率和较长的离心时间。

盐析后溶液应进行脱盐,常用的办法有透析、

凝胶过滤及超滤等。;(二)盐析的主要应用;二、有机溶剂沉析;影响有机溶剂沉析的因素;(二)生物样品的浓度;(三)pH;(四)离子强度;(五)金属离子;有机溶剂沉析的应用;(二)应用;三、等电点沉析;等电点沉析的注意事项;等电点沉析的应用;有机聚合物沉析;有机聚合物的种类;有机聚合物沉析的应用;其他沉析技术;二、有机酸沉析;三、选择变性沉析;实验四 等电点沉析法分离牛乳中的酪蛋白;目的要求;原理;材料用具;等电点沉析制备酪蛋白;;注意事项;思考题;实验五 乙醇沉析法提取柑橘皮中的果胶;目的要求;原理;材料用具;

分离;

浓缩;

沉析;

分离;

干燥;注意事项;注意事项;思考题;实验六 硫酸铵??级盐析分离血清中的主要蛋白质;目的要求;原理;材料用具;清蛋白与球蛋白分离;各种球蛋白的分离;各种球蛋白的分离;注意事项;思考题

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