巴豆叶挥发油化学成分的gc-ms分析.docxVIP

巴豆叶挥发油化学成分的gc-ms分析 科登科。世界上有800多种，中国有21种，分布在南方省份（邱华亭，1996）。该属植物中的多数品种能入药,具有广泛的生物活性,如抗癌(Rakotonandrasanaet al.,2010;Santoset al.,2009)、抗炎镇痛(Kuoet al.,2007;Zhaoet al.,2012)、血管松弛(Baccelliet al.,2007)、昆虫拒食(Niheiet al.,2006)、抗胃溃疡(Paulaet al.,2008)、止血(Robertet al.,2010)等。巴豆属植物的挥发性成分一直受到各方面重视,较有名的巴豆油就是提取来自巴豆种仁的脂肪油,临床上广泛用于治疗中风、喉痹、腹胀等症状,现代药理实验证实其还有强烈的泻下作用。近来有研究发现Croton zehntneri挥发油有促伤口愈合的作用(Cavalcantiet al.,2012),Croton sonderianus挥发油有影响气道平滑肌的作用(Pinho-da-Silvaet al.,2010),Croton campestri枝叶的挥发油有调节抗生素的作用(Almeidaet al.,2013)。石山巴豆(Croton euryphyllus)与毛果巴豆(Croton lachynocarpus)是两种典型的岩溶石山植物。我们在前期研究中发现石山巴豆和毛果巴豆叶子的低极性石油醚提取部位均表现出较明显的抗癌作用,两者对多数所筛选癌细胞株的半数抑制浓度(IC50)均小于50 μg/mL。因此,本文采用气相色谱-质谱联用技术对石山巴豆与毛果巴豆中挥发油成分进行分析,以面积归一化法计算各个峰的相对含量,为石山巴豆与毛果巴豆的综合开发利用提供科学依据。 1 材料和方法 1.1 gc-ms联用仪 石山巴豆(Croton euryphyllus)采自广西平果县,毛果巴豆(C.lachynocarpus)采自广西阳朔县,均由广西植物研究所许为斌博士鉴定并保存于广西植物研究所标本馆。7890A /5975C型GC- MS联用仪(美国Agilent公司生产);无水乙醚、无水硫酸钠均为AR。 1.2 乙醇萃取法 分别称取切碎的石山巴豆和毛果巴豆干叶100 g,水中蒸馏 6 h,乙醚萃取,无水硫酸钠干燥,过滤后室温挥去乙醚得挥发油,为淡黄色油状液体。 1.3 测试方法 气相色谱条件:色谱柱为 HP-5MS 5% Phenyl-Methyl Siloxane(30 m×0.25 mm×0.25 μm)弹性石英毛细管柱;柱温:50 ℃,保持5min,以10 ℃/min速率升温至180 ℃,保持3 min,又以5 ℃/min速率升温至225 ℃,汽化室温度250 ℃;FID检测器温度为290 ℃;载气:体积分数99.999%的高纯氦气;流速:1.0 mL/min;进样方式:GC自动进样器;进样量:3.0 μL。 质谱条件:EI离子源温度为230 ℃;MS四极杆温度150 ℃;电子能量为70 eV;接口温度为280 ℃;溶剂延迟4.0 min;质量范围20～400 amu。 2 结果与讨论 2.1 色谱条件下的分离效果 按上述实验条件对石山巴豆叶和毛果巴豆叶中的挥发油化学成分进行GC-MS分析,在同一色谱条件下均得到较好的分离,总离子流程图见图1。从石山巴豆和毛果巴豆叶中分别鉴定出39、55种成分,分别占挥发油总量的95.96%和97.8%,挥发油经GC-MS进行分析,质谱数据库(NIST标准谱库)检索并结合谱图人工解析,结果见表1。 2.2 挥发油层结构类型,仅以高效液相结构为主导成分,其主要成分为 从表1可知,从石山巴豆叶的挥发油中鉴定出39个成分,占挥发油总量的95.96%,主要成分有单萜醇类,如α-松油醇(17.57%)、桉树醇(11.13%)、龙脑(4.48%)、芳樟醇(1.72%)等;单萜酯类,如乙酸松油酯(9.07%);倍半萜烯类,如倍半水芹烯(8.52%)、α-红没药烯(5.15%)、姜黄烯(2.50%)、石竹烯(1.33%)等;倍半萜醇类,桧脑(3.28%)、斯巴醇(1.57%)、红没药醇(1.35%)、杜松醇(1.27%)等。 在毛果巴豆叶中的挥发油里鉴定出55种成分,主要成分是反式-橙花叔醇(9.48%)、α-松油醇(7.51%)、桉树醇(6.43%)、乙酸松油酯(6.72%)、倍半水芹烯(5.18%)、α-红没药烯( 5.01%)、石竹烯(3.02%)等。这些成分的结构类型与石山巴豆相似,亦以单萜醇类、单萜酯类、倍半萜烯类、倍半萜醇类为主。与石山巴豆相比较,共有成分34种,占挥发油总量的69.72%,表明同属植物中的化学成分存在较高同源性,但也存在显著的特异成分,如毛果巴豆中相对含量较高成分为反式-橙花叔醇