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v V [S] Vmax 斜率-Km 当前第30页\共有86页\编于星期三\11点 四、多底物的酶促反应动力学 分为单底物、双底物和三底物反应 1.酶促反应按底物分子数分类: 当前第31页\共有86页\编于星期三\11点 ①有序反应(ordered reactions) 先导底物 释放 释放 A和Q竞争地与自由酶结合 (1)序列反应或单置换反应 2.多底物反应按动力学机制分类: 当前第32页\共有86页\编于星期三\11点 ②随机反应(random reactions) 如肌酸激酶使肌酸磷酸化的反应 当前第33页\共有86页\编于星期三\11点 A AE PE` P E E` Q EQ EB B A和Q竞争自由酶E形式 B和P竞争修饰酶形式E’ A和Q不同E’结合 B和P也不与E结合。 (2)乒乓反应或双-置换反应 当前第34页\共有86页\编于星期三\11点 3.双底物反应的动力学方程 (1)序列机制的底物动力学方程及动力学图 —— 在B的浓度达到饱和时A的米氏常数 —— 在A的浓度达到饱和时B的米氏常数 —— 底物A与酶结合的解离常数 —— 底物A、B都达到饱和时最大反应速率 当前第35页\共有86页\编于星期三\11点 当前第36页\共有86页\编于星期三\11点 (2)乒乓机制的底物动力学方程及动力学图 —— 在B的浓度达到饱和时A的米氏常数 —— 在A的浓度达到饱和时B的米氏常数 —— 底物A、B都达到饱和时最大反应速率 当前第37页\共有86页\编于星期三\11点 当前第38页\共有86页\编于星期三\11点 五、影响酶促反应速率的其它因素 当前第39页\共有86页\编于星期三\11点 (一)pH 对酶反应的影响 最适pH时的酶活力最大 最适pH因酶而异,多数酶在7.0左右 是酶的特性之一,但不是特征常数 pH 最适 pH v 影响 当前第40页\共有86页\编于星期三\11点 原因: ?过酸过硷导致酶蛋白变性 ?影响酶分子解离状态、影响酶的活性中心构象 ?影响底物分子解离状态 当前第41页\共有86页\编于星期三\11点 (二)温度对酶反应的影响 影响: 1、在达到最适温度以前,反应速度随温度升高而加快。 2、在达到最适温度以后,反应速度随温度升高而下降。 当前第42页\共有86页\编于星期三\11点 原因: 温度升高,活化分子越多,反应速度快;当温度过高,酶变性,反应速度下降。 当前第43页\共有86页\编于星期三\11点 几个概念: 温度系数: 最适温度: 酶的最适温度不是一个固定不变的常数。 最适温度 动物酶 35~40℃ 植物酶 40~50℃ 微生物 大部分 40~50℃ 个别高温菌 90℃以上 当前第44页\共有86页\编于星期三\11点 (三)激活剂对酶反应的影响 定义:凡是能提高酶活性的物质,称为酶的激活剂(activator) 类别 金属离子:K+、Na+、 Mg2+、Cu2+、Mn2+、Zn2+、Se3+ 、 Co2+、Fe2+ 阴离子: Cl-、Br- 有机分子 还原剂:抗坏血酸、半胱氨酸、谷胱甘肽 金属螯合剂:EDTA 当前第45页\共有86页\编于星期三\11点 六、酶的抑制作用 抑制剂:使酶促反应速率减慢或完全停止的物质。 抑制作用:抑制剂与酶的必需基因结合,而降低酶活力甚至使酶完全丧失活性的效应。(有选择性) 失活作用:使酶Pr变性而引起酶活力丧失。无选择性。 (一)抑制作用的概念 1、概念 当前第46页\共有86页\编于星期三\11点 2、抑制程度的表示方法 V0 : Vi : 不加入抑制剂时的反应速率 加入抑制剂后的反应速率 以反应速率的变化表示 当前第47页\共有86页\编于星期三\11点 1.相对活力(残余活力分数) Vi V0 2.抑制分数 指被抑制而失去活力的分数 V0 Vi 当前第48页\共有8
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