植物病原细菌研究方法.pptxVIP

植物病原细菌研究方法;内容提纲：; 细菌的基本形态特征;细菌的形态和大小 细菌的细胞结构 细菌的繁殖与群体形态;;第6页/共116页;;;（二）、 细菌的形态; 球状、杆状和螺旋状;;2.杆菌 杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不同,菌体细胞的长短、粗细等都有所差异。 杆菌的形态：短杆状、长杆状、棒杆状、梭状、梭杆状、月亮状、分枝状、竹节状等；按杆菌细胞的排列方式则有链状、栅状、“八”字状以及有鞘衣的丝状等。;2.杆 菌;链状杆菌; ;3、螺旋菌螺旋状的细菌称为螺旋菌。根据其弯曲情况分为：弧菌：螺旋不满一圈，菌体呈弧形或逗号形 例：霍乱弧菌、逗号弧菌螺旋菌：螺旋满2—6环，螺旋状 例：干酪螺菌 螺旋体：旋转周数在6环以上，菌体柔软。 例：梅毒密螺旋体;螺旋菌; 细菌的特殊形态： 柄细菌、肾形菌、臂微菌、网格硫细 菌、贝日阿托氏菌(丝状)、具有子实体的粘细菌、三角形、方形等特殊形态的细菌。; ;;细菌细胞结构;1.固体斜面培养 2. 液体培养基 3. 半固体培养;植物病原细菌概述 绝大多数为好气性细菌；生长温度大多为25-28℃，少数可以20℃或在35℃中（如青枯菌）生长。 植物病原细菌都不产生芽孢，因此对高温比较敏感，一般在50℃左右的热水中处理10分钟即失活，适宜的pH为6-7。;植物病原细菌的革兰氏染色 （细菌的革兰氏染色反应是细菌分类鉴定的一个重要特征）;;革兰氏阴性菌细胞壁：分内壁层和外壁层。 ;革兰氏染色的原理;革兰氏染色原理： 第一步：结晶紫使菌体着上紫色； 第二步：碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内； 第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应； G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色； Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能??其结构收缩，因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红色。; 革兰氏染色法是细菌细胞的复合染色法，由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。 基本步骤： 涂片固定—— 结晶紫初染1min—— 碘液媒染1min——95%乙醇脱色0.5min—— 番红复染min 结果: 革兰氏阳性菌——紫色； 革兰氏阴性菌——红色。;;;;;革兰氏染色阴性——大肠杆菌 ;革兰氏染色阳性——枯草芽孢杆菌;;鞭毛：某些细菌表面由细胞内生出的细长、波曲、毛发状的结构。 鞭毛具有运动功能，一般认为鞭毛靠鞭毛丝旋转而动，它们是细菌的“运动器官”。 鞭毛的长度： 一般为15—20 μm，最长可达70 μm 。 鞭毛的直径：为0.01—0.02 μm. 不同细菌的鞭毛数目和着生位置不同，鞭毛数目一般一至数十条。;鞭毛的着生方式：;鞭毛的化学组成： 主要由鞭毛蛋白构成，还含有少量的多糖、脂类和核酸等。 鞭毛起源于细胞质膜内侧的基粒。 细胞质区内有一个颗粒状小体，此小体为基粒，鞭毛自基粒长出穿过细胞壁延伸到细胞外部。;;鞭毛的观察： 电镜 特殊鞭毛染色，在光学显微镜下观察 半固体穿刺培养 从固体培养基上的菌落形态判断 一般情况下： 菌落形状大，薄且不规则，边缘极不平整，可能有鞭毛。菌落十分圆滑，边缘平整且相对较厚，可能没有鞭毛。; 实验菌种及药品 1．菌种：枯草芽孢杆菌 2．染液 染液A： 单宁酸 5.0g 氯化铁（Fecl36H2O） 1.5g 福尔马林（15％） 2.0ml （15%福尔马林：40%甲醛4ml+蒸馏水6ml） NaOH(1%) 1.0ml 蒸馏水 100ml