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急性白血病的系别判断王卉河北燕达陆道培医院检验科副主任? 流式细胞室主任(副院级)信纳克实验室主任,内容?FCM判断AL的系别?特殊情况下的系别判断1
FCM判断AL系别做免疫分型的基本思路?根据与正常标本的对比,找出幼稚细胞群?根据该群细胞表达的标志,判断细胞性质:系别、阶段?根据其他系别标志的表达情况,做鉴别诊断?髓系要看其他髓系亚群的比例?根据血液病诊断标准,做出疾病诊断2
流式细胞术判断急性白血病? 急性白血病:? 20%或者25%以上细胞? 表达早期标志(CD34,HLA-DR,TdT)或者不表达成熟标志? 系别标志? 髓系:?MPO,CD13,CD33,CD117,CD15,CD11b,CD14,CD64,CD36,CD11c,CD61,CD41a,CD42a? B系?cCD79a,CD19,CD22,CD10,cIgM,CD20,kappa,lambda? T系?CD2,cCD3ε,CD5,CD7, CD1a, CD4,CD8, TCR, CD3AML M4Eo3
特殊情况下的系别判断急性白血病中伴系标志表达MPO73%0CD1429%0CD1390%25%32%CD1551%21%9%CD3385%2%CD65sCD117AML57%79%ALL-TALL-B14%11%0030%11%2.4%CD2cCD30-1.2%100%0CD4CD54%CD7CD5613%22%6%TdT18%69%86%AML18%57%6%63%47%ALL-TALL-B61.1%19%90%2%100%2.4%CD218%57%6%cCD30-1.2%100%0CD4CD54%CD7CD5613%22%6%TdT18%69%86%AML63%47%ALL-TALL-B61.1%19%90%2%100%2.4%4
欧洲白血病免疫分型研究组(EGIL)积分系统积分B细胞系cCD79acIgMT细胞系髓系2CD3(c/m) MPO抗TCRcCD22CD191CD2CD5CD8CD10TdTCD117CD20CD13CD33CD65CD14CD15CD64CD100.5TdTCD24CD7CD1a2008年WHO细胞系别确定标准:髓系MPO(流式细胞术、免疫组化或者细胞化学)或单核系分化(非特异性酯酶弥漫性阳性,或者CD11c、CD14、CD36、CD64、溶酶体,两个及以上阳性)T系胞浆CD3 (流式抗体,PE或APC等强荧光素,强度接近正常T)或胞膜CD3(MPAL中比较罕见)B系CD19强表达加下述标志中至少一个强表达:CD79a、胞浆CD22、CD10或CD19弱表达加下述标志中至少两个强表达:CD79a、胞浆CD22、CD105
2008 WHO附加注意事项?cCD3最好选用强荧光素PE或者APC,强度要和标本中剩余的正常T细胞一样或者接近?罕见情况下,CD19阴性也可以归为B系,但必须小心,因为CD79a和CD10都缺乏特异性两个诊断标准谁优谁劣?6
MPAL预后更差,EGIL分类比WHO分类OS更显著。21岁以下MPAL预后好,EGIL评分更明显WHO与EGILOS无差别7
2016WHO附加注意事项?有些流式的MPO抗体与B淋母有非特异性结合,少数真的MPO阳性,这类病例意义不明。ALL-B如果髓系成分只有MPO阳性,诊断需谨慎。?这种情况下其他指标如细胞化学POX,流式的其他髓系标志CD117,CD13,CD33有助于帮助判断。?MPAL中,系别标志的荧光强度,FSC也有助于诊断:如淋系成分会强表达淋系标志,弱表达髓系标志,FSC偏小;髓系成分反之亦然。急性系列不清白血病(ALAL)? 主要包括三种:? 急性未分化型白血病(AUL):缺乏足够的形态学、细胞化学、免疫分型证据表明原始细胞为髓系或者淋系? 急性无法分类白血病? 急性混合细胞白血病:? 急性双克隆白血病:两群以上细胞,分别有髓系和/或T、B系的形态学和/或免疫表型特征? 急性双表型白血病:一群细胞同时有B、T系或者髓系的形态学和/或免疫表型特征? 其他罕见:三系白血病(T/B/M)8
ALAL主要鉴别点? 系别抗体的数量、质量(表达强度)、特异性系别抗体数量与质量AUL1个非特异性抗体急性无法分类白血病2个非特异性,或者1个特异性弱表达MPAL1个特异性+1个非特异性或者三个非特异性? 注意:荧光强度很重要,伴随表达往往弱表达,排除细胞本底的影响,高表达往往提示有此系别系别标志? 特异性高的系别标志:? 髓系:MPO、CD64、CD14、CD61、CD42b、CD41a、CD235a? T系:cCD3、CD3、TCRab, TCRrd? B系:c/sIgH、c/skappa、c/slambda、CD79b(cCD79a、CD22分病种相对特异性高)? 特异性
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