自身抗体临床检测的质量保证 国家卫生计生委临床检验中心 李金明.pptxVIP

自身抗体临床检测的质量保证李金明 国家卫生计生委临床检验中心2017.10.19. 深圳 自身抗体检测的特点：三“多”一“差”? 检验项目 多? 方法多：ELISA、免疫印迹（WB）、化学发光免疫试验（CLIA）、间接免疫荧光试验（IIF）、放射免疫试验（RIA）、对流免疫电泳法（CIE）、免疫双扩散法（DID）、流式荧光免疫试验（Luminex）等? 手工操作 多不同方法或试剂间结果可比性“较差” 自身抗体检测的临床意义?自身免疫病的诊断?疾病活动性指标 涉及临床医生标本采集环节和实验室检验申请单；标本采集、运送和保存（分析前）质量保证 (QualityAssurance,QA)：为一产品或服务满足特定质量要求提供充分可信性所必要的有计划的和系统的措施质量保证结果报告解释及临床应用（分析后）室内质控（分析中）涉及实验室人员和临床医生涉及实验室质量控制室间质评（分析中）涉及实验室 目前自身抗体检测质量保证方面存在的问题? 实验室环境条件不能满足要求? 仪器设备维护校准不够? 试剂方法不会进行性能验证以及没有批间质检? SOP没有可操作性? 没有开展室内质量控制? 没有参加室间质量评价或不知道为何要参加？? 人员培训不够，不会进行能力评估? 不与临床沟通或沟通不够 分析前 检验申请单和标本采集、运送和保存中的关键点? 对“Who”在“When”开出“What”申请单? 容器：密闭的、一次性、无菌? 采集方法：人（训练有素）、防污染? 保存时间和温度：4℃可保存2-3天，更长时间，则在-20 ℃以下，避免反复冻融。? 合格标本:容器完整、量够、时间符合要求、外观符合要求（避免重度溶血和脂血标本，其会增加非特异荧光背景 ） 分析中室内质量控制和室间质量评价 室内质量控制(IQC）?测定前的质量控制?非统计和统计学质量控制?质量控制的评价 测定前质量控制?实验室设施、仪器设备及管理?理想的试剂和操作方法?人员培训 实验室环境条件的控制?温度?湿度不只是为了仪器设备运行抗原抗体结合反应与环境温度和湿度均有关系 实验室仪器设备及管理? 加样器：维护、校准? 荧光显微镜：维护、校准? 水浴箱：维护、校准? 酶标仪：维护、校准? 洗板机：维护? 离心机：维护? 生物安全柜：维护? 冰箱：维护 理想的试剂?试剂方法的性能验证及每批试剂的质检?性能指标：重复性（精密度）准确性（定量：回收率、标准物质等；定性：方法学比较等）线性范围（定量）分析特异性参考区间测定下限抗干扰能力 自身抗体国际标准物质（一）项 目编 号浓度（IU/瓶）研制者ANA（均质型）WHO66/233100CLB抗ds DNA抗体RFWHO Wo/80WHO-64/1WHO-64/1WHO480010WHO anti-RNPWHO65/09397/550200100100100CLBCLBAPFCLBFITC 抗Hu Ig抗RNP 抗体抗甲状腺球蛋白抗体抗胰岛细胞抗体CLBCLB1000200NIBSCNIBSC抗谷氨酸脱羧酶抗体97/550100NIBSC 自身抗体国际标准物质（二）项 目编 号浓度（IU/瓶） 研制者抗酪氨酸磷酸酶抗体97/550100NIBSC抗心磷脂抗体狼疮抗凝物93/7680.85NIBSCNIBSCAF-CDC96/522ANA（均质型、核周型）抗ds DNA抗体ANA#1（IS2072）ANA（颗粒型）抗SSB/La抗体ANA#2（IS2073）AF-CDCANA抗核抗体（颗粒型）抗U1-RNP 抗体ANA#3（IS2074）ANA#4（IS2075）ANA#5（IS2076）AF-CDCAF-CDCAF-CDC抗Sm 抗体 自身抗体国际标准物质（三）项 目编 号浓 度（IU/瓶） 研制者抗核抗体（核仁型）抗fibrillarin 抗体（U3-RNP）ANA#6（IS2100）AF-CDC抗SSA\Ro 抗体ANA#7（2105）AF-CDCAF-CDCAF-CDCAF-CDCAF-CDC抗核抗体（着丝点型） ANA#8（2134）抗Scl-70 抗体抗Jo-1 抗体ANA#9（2135）ANA#10（2187）ANA#11（2310）Lot#C103BG抗PM/Scl 抗体抗SSA/Ro抗体滴度1:4~1:32CAP WHO抗核抗体国际标准物质66/233的使用? Holborow等建议：如果一个特定的实验室WHO66/233的测定终点是1:160，则终点稀释度含100*1/160=0.625 IU/ml。不同实验室和检测系统间的差异可通过以相同的IU/ml来报告结果来减小或消除。? WHO 66/233的缺点：其不适用于斑点型或其他型核荧光的参考，并且当总抗体量相近，但亲合力不同，给出的终点也不同。此外，该标准物质所含的ANA多为IgG，因此最好