《食品安全快速检测技术》教学课件—07食品微生物快速检测技术.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * 适用范围 各类食品及动物饲料中的沙门氏菌快速检测 检测原理 在检测装置的样品孔中加入一部分富集培养物。样品沿检测装置流动，出现易于区分的可见结果。如果只在对照区形成一个条带，则样品为沙门氏菌阴性；在对照区和检测区同时出现条带，则可初步鉴定样品为沙门氏菌阳性。检测及初步鉴定在短短的21小时内即可完成。这是一种快速定性方法。 一、试剂盒法 主要仪器 恒温培养箱、冰箱、恒温水浴锅、电子天平、均质器、振荡器、微量移液器 试剂 ①无菌生理盐水：称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。 ②1mol/L氢氧化钠：称取40g氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水。 ③1mol/L盐酸：移取浓盐酸90mL，用蒸馏水稀释至1000mL。 操作步骤： 1 检品处理后待用 2 溶解预富集培养基 3 向预富集培养基加入样品，在36±1℃的培养箱中培养2～4h 4 溶解选择性富集培养基 5 向预富集样品中加入选择性富集培养基，在42±1℃的培养箱中培养16～18h 6 富集后从袋子中取出液体样品，并冷却至室温。 7 向样品孔中滴入自由滴落的5滴样品。 8 等待15分钟后，观察记录结果。 结果判定 如果只在对照区形成一个条带，则样品为沙门氏菌阴性；在对照区和检测区同时出现条带，则可初步鉴定样品为沙门氏菌阳性。 项目五 金黄色葡萄球菌快速检测 检测意义 食品中若有金黄色葡萄球菌生长是一种潜在的危险，因为它可以产生肠毒素，食用后能引起食物中毒。因此，检查食品中金黄色葡萄球菌有实际意义。 适用范围 各类食品中金黄色葡萄球菌的快速检测。 检测原理 将选择性培养基中加入专一性的酶显色剂，并将其加载在纸片上，通过培养，如果样品中含有金黄色葡萄球菌，即可在纸片上呈现紫红色的菌落。 一、测试片法 主要仪器 恒温培养箱、冰箱、恒温水浴锅、电子天平、均质器、振荡器、微量移液器 试剂 ①无菌生理盐水：称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min。 ②1mol/L氢氧化钠：称取40g氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水。 ③1mol/L盐酸：移取浓盐酸90mL，用蒸馏水稀释至1000mL。 操作步骤 1）样品前处理：无菌称取25g(mL)样品放入盛有225mL生理盐水的无菌锥形瓶或均质袋中。均质器中制成混悬液。 2）样品接种：将测试片水平放在台面上，揭开上盖膜，用微量移液器吸取1mL样品上清液或增菌液，均匀加到中央的滤纸片上，然后轻轻将上盖膜放下。 3） 样品培养：将加了样的测试片，置于37℃培养箱内培养15～24h。 结果判定 对培养后的测试片进行观察，呈紫红色的菌落为金黄色葡萄球菌。 注意事项 1）对于一些经过烘烤加热或冷冻的食品样品，最好先用7.5%Nacl肉汤进行预增菌，使“硬伤”、冷冻的金黄色葡萄球菌复苏，然后再用本品检测。 2）使用过的测试片上带有活菌，及时按照生物安全废弃物处理原则进行无害化处理。 Thank You! 绪论 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * L/O/G/O 模块六 食品微生物快速检测技术 学习目标 了解食品微生物现状及其卫生学意义; 熟悉现代检测技术在食品微生物检验领域的应用 掌握测试片法对食品中菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌的快速检测方法。 食品微生物 检测指标 致病菌 各类食品有限量标准 菌落总数 大肠菌群 背景知识： 不得检出 传统微生物检测方法与快速测定技术比较 传统方法 快检技术 培养、分离、生化鉴定 分类、检测、鉴定、计数 费时费力、操作繁杂 不需准备、不需增菌 占用检测资源 缩短时间、方便携带 生产中不利于在线控制 操作简便易掌握 监管中反应不迅速 提高效率、现场即时检测 常见的微生物快速检测方法： 免疫学技术 生化检测技术 基因芯片技术 仪器分析法 项目一 菌落总数的快速检测 检测意义 食品中菌落总数的测定是用来判定食品被细菌污染程度的一项指标，目的在于了解食品生产过程中，从原料加工到成品包装受外界污染情况，可以应用这一