福州地区献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染及其基因型与突变的研究-免疫学专业论文.docxVIP

福建医科大学硕士学位论文 福建医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 10 目 录 英文缩略词????????????????????????4 中文摘要?????????????????????????5 英文摘要?????????????????????????7 前言???????????????????????????9 1 材料与方法 ??????????????????????14 1.1 主要仪器与试剂 ?????????????????14 1.2 研究方法 ????????????????????15 2 结果 ?????????????????????????18 2.1 福州地区无偿献血者人群OBI流行状况????????18 2.2 OBI 样本 HBV DNA 定量???????????????19 2.3 HBV 的 S 区基因扩增及序列测定???????????20 2.4 OBI 样本的 HBV 基因型和 S 区氨基酸突变分析?????21 3 讨论 ?????????????????????????24 结论 ??????????????????????????30 参考文献 ????????????????????????31 综述 ??????????????????????????35 致谢 ??????????????????????????53 英 文 缩 略 词 （Abbreviation） 英文缩写 英文全称 中文全称 OBI HBV Occult hepatitis B virus Infection hepatitis B virus 隐匿性乙型肝炎病毒感染 乙型肝炎病毒 HCV hepatitis C virus 丙型肝炎病毒 HIV Human Immunodeficiency Virus 人类免疫缺陷病毒 ELISA enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附实验 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链反应 TMA transcription mediated amplification 转录介导的扩增技术 NAT nucleic acid test 核酸检测技术 DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 MHR major hydrophilic region 主亲水区 ddH2O double distilled water 双蒸水 bp base pair 碱基对 ml milliliter 毫升 μl microliter 微升 min minute 分钟 Ct Cycle threshold 循环阈值 福州地区献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染 及其基因型与突变的研究 中文摘要 目的：探讨福州地区无偿献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染（OBI）状况，并 对 OBI 的 HBV 基因型分布特征与 S 区氨基酸突变进行分析。 方法：应用血清学方法常规筛查 HBsAg 与核酸检测技术（NAT），对福建省福州市 102 866 例无偿献血者样本进行乙型肝炎病毒（HBV） DNA 检测，筛选出 HBsAg- HBV DNA 阳性样本并判定其感染状态；应用实时荧光定量 PCR 技术对排除 HBV 感 染窗口期的 OBI 样本进行 HBV DNA 检测；S 区基因巢式 PCR 扩增和序列测定；使 用 MEGA5.0 软件进行 HBV 基因分型和 S 区氨基酸突变分析。 结果：（1）102 866 例福州地区无偿献血者样本共筛查出 75 例 HBsAg- HBV DNA 阳性样本，其中排除 HBV 血清学标志物乙肝两对半检测结果均为阴性的 9 例样本， 共筛查出 OBI 样本 66 例，福州地区无偿献血者人群 OBI 感染率为 0.064 66/102 866）；上海、深圳、厦门、福州等地的 OBI 感染率不全相同（P0.001），其中厦 门地区的 OBI 感染率最高（P0.001），而上海、深圳、福州三个地区的 OBI 感染 率相近(P0.05)。（2）66 例 OBI 样本中，抗-HBc 阳性(伴有或不伴有抗-HBs 阳 性)的样本共 62 例，占 OBI 样本总数的 93.9%（62/66）；单纯抗-HBc 阳性 37 例，占 56.1%（37/66）；单纯抗-HBs 阳性 4 例，占 6.1%(4/66)。（3）66 例 OBI 样本中有 12 例检出 HBV DNA，检出率为 18.5%（12/66），样本整体循环阈值（CT 值）均在 40 左右，定量结果显示 HBV DNA 拷贝数为 13～302 IU/ml，仅 1 例样 本的 HBV DN