MirRNA101在心房颤动心肌细胞钙超载中的作用研究.docVIP

MicroRNA-101在心房颤动心肌细胞钙超载中的作用研究 目录 主要英文缩写索引 ItfW 中文 英文 MicroRNA-101、L型钙通道P 2亚基及钠钙交换体在风湿性心房颤动右心房肌组 织中的表达变化 1材料和方法 2统计学分析及结果 3讨论 4结论 5 全文总结 综述 致谢 附件 前言 心房颤动(atrial fibrillation, AF)是指规则有序的心房电活动消失， 代之以不规则无序的快速心房颤动波，是最严重的心房电生理紊乱，也是临床上 最常见的心律失常之一。由于心房颤动时心房失去了有效的收缩和舒张活动，进 而导致泵血功能下降或者丧失，由此可引发心室律紊乱、心功能受损、心房血栓 形成等一系列并发症，并￡L随着人口老龄化，发病率越来越高，致残率和致死率 也逐步上升。 目前房颤的作用机制尚未完全清楚，目前认为房颤的发生和维持是多种机制 共同作用的结果，主要涉及一是心房颤动的触发因素，触发因素多种多样，但是 肺静脉电活动触发最常见；二是心房颤动发生和维持的机制。心房颤动有较多的 机制和学说，较为经典的冇：一是Lewis［11于1920年提出的折返激动学说和Moe ［2］于1959年提出的多发子波折返学说；多发子波折返学说认为，心房A存在着 一定数量的心肌细胞来维持子波的折返，子波在心房内不断地折返、碰撩、融合、 湮灭，并伴随着新的子波形成，心房内的有效不应期和传导速度影响着多发子波 折返的形成和维持。二是局灶激动学说，Haissaguerr等［3］最早提出了肺静脉波 假说，其认为肺静脉及其周围心房组织是心房颤动维持的关键部位，一方面来 自肺静脉的快速局灶兴奋在肺静脉及其周围心房组织易于出现颤动样的传导，另 一方面激动在此处易于形成微折返，使心房颤动维持下去。肺静脉波假说本质 上也是一种局灶激动学说。而导管消融这些异位兴夼灶可以阻断心房颤动的发 生，使心房颤动得到根治同样证实了这一学说。三是心房重构和祌经、体液因子 的作用。其中心房重构包括电重构和结构重构，心房重构早期以心房肌细胞离子 通道的电生理及特性发生改变为主，后期可发生心房纤维化、淀粉样沉积、细胞 凋亡等结构重构的改变。多数情况下认为，心房电重构是结构重构的基础。心房 电重构是由Wijffels等［4］于1995年提出的，心房的超速起搏可诱发房颤，或者 是在房颤、快速心室率及其他条件下心房肌可发生电生理特性的改变，并反过来 促进房颤的发生和维持，随着刺激吋间的延长，房颤的维持吋间亦延长(房颤诱 发房颤)。电重构的主要表现为心房有效不应期及动作电位时程缩短，频率适应 性降低，动作电位传导速度减慢，不应期离散率增大，从而有利于房颤的发生和 维持15］。其基础是基础是心房肌细胞跨膜离子流的改变，房颤时L型钙通道Ca2 +内流的Ca2+增多，延长了动作电位吋程，提高了平台期电位水平，诱发细胞内 钙超超载，使激动传导波长缩短，有利于折返的形成［61。 尽管目前导管消融术己经在治疗房颤上取得了长足的进步，但是药物治疗手 段依然是目前治疗房颤的主要方式。因此，积极寻找新的靶点对临床房颤的防治 十分重要。 微小RNA ( microRNA )是一种长度约22个核苷酸的非编码RNA,近年来多 种研宂表明microRNA的多种亚型与心律失常的发生有关，L型钙通道表达的改 变亦与房颤相关。Luo等利用microRNA芯片分析发现microRNA-101下调与房颤 有关，并在快速起搏房颤犬上予以验证［7_9］，他们随后应用TargetScan等生物信 息学软件对microRNA-101的靶基因进行预测，发现表达L型钙通道｛3 2亚基(C ACXB2)是它的靶基因，但未做深入研究。本研究应用实吋荧光定量PCR (qRT-P CR)分别检测 microRNA-101 和 CACNB2 的 mRNA 的表达，以及用 Western Blot 方法检测CACXB2蛋白的表达，探讨miRNA-101及其调节的CACNB2在房颤中的表 达变化，进一步预测CACNB2可能是miRNA-101的靶基因，从而为进一步探讨房 颤的作用机制提出更多的理论依据。 Wijffels等于1995年首次提出房颤心房电重构的概念，即心房颤动诱发心房 颤动，心房电重构主要分子机制是离子通道蛋0数量、结构、性质的改变所致。 心肌组织中有多种Ca2+蛋白，电压依从性钙通道分为L型和T型，其中L型钙 通道产生的内流性钙电流(ICaL)在调节人类心房频率依赖性有效不应期及动作 电位时程的变化中起重要作用。钙超载是心房电重构的始动因素。房颤时心肌细 胞内Ca2+超负荷，可引起动作电位吋程缩短，导致心房电重构。CACNB2位于 细胞内胞浆面，与＜1 i亚棊共同表达的时候发挥作用。CACNB2伴随着a i亚棊 从内