气相色谱测糖酸组分.pptVIP

气相色谱法测定柑橘果肉糖酸含量 2010.11.14农大 参考制作 学习目标及报告内容： 理解气相色谱原理、熟悉仪器系统和构造 了解气相色谱仪器的操作 通过气相色谱法对样品组分进行定性和定量分析，检测柑橘果实的糖酸含量。 为什么用气相色谱 (chromatography) ？ If you can do it by GC,You should do it by GC. -H.M.McNair 如果你能用气相色谱完成，你就应该用气相色谱完成。 主要内容 气相色谱的优点 气相色谱流程及系统 气相色谱原理及理论 进样口 色谱柱 检测器 定性和定量 故障及问题 一、气相色谱的优点 高灵敏度（可测高纯、高分子物质） 高效能（速度快、准确度高） 所需样品量少（气体~毫升、液体~微升） 应用范围广（可分析的有机物占目前发现总有机物的15～20％；挥发温度＜500℃；热稳定性好；相对分子量 ＜400 ） 应用领域 二、气相色谱流程及系统 气相色谱仪 由五大系统组成：气路系统、进样系统、分离系统、温控系统、检测记录系统。 组分能否分开，关键在于色谱柱；分离后组分能否鉴定出来则在于检测器，所以分离系统和检测系统是仪器的核心。 三、气 相 色 谱 原 理 气相色谱是一种气体分离技术，它以惰性气体（即载气，一般是N2、 He等）的流动相，以表面积大且具有一定活性的吸附剂为固定相。 当多组分的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分在色谱柱中的运行速度也就不同。吸附力弱的组分容易被解吸下来，最先离开色谱柱进入检测器，而吸附力强的组分不容易被解吸下来，因此后离开色谱柱。如此，各组分得以在色谱柱中彼此分离，顺序进入检测器中被检测、记录下来。 所需器材： 样品 进样针 进样瓶 五、色谱柱 FID工作原理 在火焰头和收集极（电极）上加一电压。 在电极之间产生离子化介质和电子。 带电粒子被收集极吸引和捕获。 离子流被放大和记录。 响应 离子数目正比于碳原子数目(C-H键). 一些官能团如羰基(CO=)、羟基(－OH）、卤素（－X）、胺（NH4+）则很少或根本不会离子化。 对无机气体如H2O, CO2, SO2, 和Nox不灵敏。 火焰 以氢气和空气作为燃气。 在控制的流速下进行电子点火。 火焰无色－除非受到污染。 七、定性和定量分析 （一）定性分析方法 用保留值定性，即保留时间Tr、保留体积Vr。 在操作条件严格不变的条件下，任意物质都有保留值，在相同条件下对比已知物质和未知物质保留值，就可对某组分定性。（可靠，但不是100%的可靠！因为可能有重合峰出现。） 色谱相当重要的应用 决定组分质量、浓度或物质在样品中占的百分比 平均或标准偏差用來作分析精密度的表示 定量结果的数种计算方式 出峰高度分析 (peak high) 出峰面积分析 (peak area) 內标法 (internal standard) 外标法 (external standard) 百分归一法 (normalized percent) 出峰面积分析 范例 內标法 最可信的定量方法 将內标加入校正标准品和未知的样品中 固定內标所加入的量 出峰面积测量所产生的误差将被消除 什么是内标物？ 指将一个已知质量、样品中不含有杂质的纯物质，加入到待测样品中，以此纯物质的量为标准，对比测定待测组分的含量，该物质即内标物。 內标添加 在样品前处理时加入内标 补偿样品在前处理时的损失 内标物的要求和特性 内标必须与其它色谱峰完全分离 理化性质应接近被测物、类似物、同系物或异构体 样品中不可含内标物潜在降解物 內标物纯度要高 在测量周期内稳定 校正因子 校正因子是定量计算公式中的比例常数，其物理意义是单位面积所代表的被测组分的量。 可用下式表示： Mi– I组分的量；fi– I组分的校正因子；Ai–I组分的峰面积 定量分析的依据是被测组分的量与响应信号成正比，但相同含量的物质由于物理、化学性质的差别，即使在同一检测器上产生的信号也不同，直接用响应信号定量，必然导致较大误差。故引入校正因子。 内标法(Internal Standard) 样品中加入内标物，利用被测物与内标物校正因子的比值不变来进行定量的。 首先用被测物标准品和内标物配制标准溶液，求得校正因子比值： 然后，再由它和样品的峰面积来计算： fis＝fi/fs －内标物与被测组份校正因子的比值； mi－