DB—1MS气相色谱柱法测定面包和糕点中甜蜜素.docVIP

DB—1MS气相色谱柱法测定面包和糕点中甜蜜素 　　摘要：建立一种运用ＤＢ－１ＭＳ毛细管色谱柱测定面包和糕点中甜蜜素的分析方法。甜蜜素和ＮａＮＯ２在Ｈ２ＳＯ４酸性条件下生成环己基亚硝酸酯，运用ＤＢ－１ＭＳ毛细管色谱柱进行测定。在１．０～５０　μｇ／ｍＬ线性范围内，衍生化后标准曲线的重现性较好，相关系数为０．９９９　９。当添加浓度为０．０６　ｇ／ｋｇ时，方法回收率为８８．５％～１０８．３％；分流比为５∶１时，方法检出限为１０．８　ｍｇ／ｋｇ。本法灵敏度高，方便快速，具有良好的回收率和方法检出限，适用于面包、糕点中甜蜜素的检测分析。 　　关键词：ＤＢ－１ＭＳ毛细管色谱柱；甜蜜素；重现性 　　中图分类号：Ｏ６５７．７ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）24－5771-03 　　甜蜜素（环己基氨基磺酸钠）是一种人工合成的非营养型食品甜味剂，广泛应用于蜜饯、酿造等各种食品。我国对食品中甜蜜素有严格的限量标准，面包和糕点中的限量均为０．６５　ｇ／ｋｇ（以环己基氨基磺酸计）［１］，美国、加拿大、欧盟和日本等国家则禁止使用甜蜜素作为食品添加剂［２］。 　　ＧＢ／Ｔ５００９．９７－２００３推荐糕点中甜蜜素测定采用薄层层析法进行分析。事实上，由于薄层色谱法的繁琐、费时以及试剂有毒等因素，正逐渐被气相色谱法所取代。目前已有不少文献相继报道了对上述国标方法的探讨和改进［３－６］。除改进前处理方法外，气相色谱条件的优化也是研究热门之一。在ＧＢ／Ｔ５００９．９７－２００３中，气相色谱法推荐使用的２　ｍＵ型不锈钢柱，也正逐渐被高灵敏度和低流失的毛细管色谱柱代替［７，８］。但是目前较多使用的毛细管色谱柱为弱极性，如ＨＰ－５［８，９］、ＤＢ－１７０１［４］，中等极性，如ＤＢ－３５［１０］和极性ＤＢ－ＦＦＡＰ［１１］等色谱柱，另有报道使用ＤＢ－１色谱柱对葡萄酒中的甜蜜素进行测定［１２］。本试验采用ＤＢ－１ＭＳ非极性毛细管色谱柱对面包和糕点中甜蜜素的含量进行了分析，以期为准确定量分析甜味剂提供有效的检测方法。 　　１ 材料与方法 　　１．１ 仪器与试剂 　　气相色谱仪Ａｇｉｌｅｎｔ　７８９０Ａ，ＦＩＤ检测器，离心机。 　　环己基氨基磺酸钠（甜蜜素）标准品购自美国Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司（纯度为９９．０％）。 　　分析用试剂为正己烷（Ｔｅｄｉａ，色谱纯）。硫酸（分析纯），亚硝酸钠（分析纯），氯化钠（优级纯）；去离子水（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）。 　　１．２ 方法 　　２ 结果与分析 　　２．１ 色谱条件的优化 　　色谱柱柱温、进样口温度、载气流速等参数均可对色谱图产生影响。本试验针对色谱柱柱温进行了选择，比较了色谱柱恒温５０、６０、７０和８０　℃的分离情况。结果表明，柱温６０　℃时得到的环己醇亚硝酸酯峰形较窄，具有较好的对称性，无拖尾现象，和环己醇能够实现有效分离（分离度＞２），该条件下色谱图见图１。另外，环己醇亚硝酸酯在６０　℃柱温条件下比５０　℃时出峰时间相对缩短，有效节约了检测时间。因此，最终选择６０　℃为最佳色谱柱温度。同时，ＤＢ－１ＭＳ的柱效较高，环己醇亚硝酸酯标准品在色谱柱中的理论塔板数可高达１０万以上，可满足检测分析的需要。由于环己醇和亚硝酸钠生成环己基亚硝酸酯是一个动态反应，高温环境放置太久，会导致环己醇亚硝酸酯峰和环己醇的峰面积均产生一定的变化，因此样品在衍生化反应完全后应及时进行气相色谱分析，以免影响定量结果。 　　２．２ 标准曲线的重现性 　　２．３ 方法回收率 　　２．４ 方法检出限 　　在分流比为５∶１的条件下，以３倍信噪比计，此３种基质的方法检出限分别为１２．５、１１．５、１０．８　ｍｇ／ｋｇ，方法灵敏度较高，即当使用不分流模式时，该方法检出限可低至２　ｍｇ／ｋｇ。 　　２．５ 检测结果 　　在分析的１２０份面包和糕点样品中，甜蜜素的检出率为６％，合格率为１００％，均未超出ＧＢ２７６０－２０１１规定的限量标准０．６５　ｇ／ｋｇ（以环己基氨基磺酸计）［１］。 　　３ 小结 　　本试验应用ＤＢ－１ＭＳ毛细管色谱柱对甜蜜素进行检测，具有较高的灵敏度和较低的方法检出限。同时，该方法的重现性较好，可适用于日常食品检测分析。需要注意的是，在高温环境中环己醇亚硝酸酯和环己醇的动态反应非常剧烈，衍生化过程必须在冰浴中进行，同时衍生化后样品尽快进行气相色谱的分析，以保证得到准确和客观的试验数据。 　　参考文献： 　　［１］　ＧＢ　２７６０－２０１１．食品添加剂使用标准［Ｓ］． 　　［２］　王 宇．食品中甜蜜素检测的研究进展［Ｊ］．职业与健康，２００８，　２４（１４）：１４４３－１４４４． 　　［３］　陈祥明，杨 方．食品中甜蜜素的快速测定［Ｊ］．中国卫生检验杂志，２００３，１３（