临床有效病理学技巧-方义湖[资料].pptVIP

临床实用病理学技术 江医上饶分院病理教研室 方 义 湖 第一讲 组织切片制作技术常规 （H-E染色法) 一、病理标本的接收 二、组织固定 三、取材 四、组织脱水 五、包埋 六、组织石蜡切片 七、常规染色 八、封片 一、 病理标本的接收 是临床与病理科交接的首要环节，程序如下： 1、核对病理申请单是否与标本匹配 名称、数目、大小、部位、组织来源、临床诊断等 2、检查标本大小与固定液比例是否合适 4%的中性甲醛或10%的中性福尔马林 小标本：6---10倍量 大标本：切开固定 3、编上病理号，录入电脑存档 二、 组织的固定 1、固定的目的和意义 目的：保持原有的形态和结构（生理、病理、免疫） 意义：是制作优秀切片的前提和基础 2、注意事项： 1）及时取材 切开固定 2）及时固定 3）液量充分 6---10倍 4）适度固定 24小时内 5）适宜温度 36---38度 6）适当搅拌 3、固定液的选择 1）单纯固定液： 10%中性福尔马林，最常用 乙醇固定液：80—95%，少用，主要用于核酸操作的固定 4%的多聚甲醛 用于细胞培养 2）混合固定液：AF; Bouin; Carnoy; Zenker. 4、操作方法： 小标本：6—10倍液体量 4小时 大标本：切开固定 18小时 三、 取 材 1、概念：对标本客观描述+切成小片装入小盒 2、取材环境：略 3、操作过程：核对、观察与描述（2.0x1.5x0.3cm)、记录、存档或照相 4、注意事项：略 四、 组织脱水 利于透明剂和石蜡的渗入 1、手工脱水 1）器械：大标本缸；浸蜡缸；脱水篮；恒温烤箱 2）流程：4%中性甲醛3 h 80%酒精1 h 90% 1 h 95%过夜 无水酒精a2 h 无水 酒精b2 h 二甲苯-无水酒精30分钟 二甲苯a30` 二甲苯b1 h 石蜡a、b、c(60度）各1 h 。 2、半自动/全自 动脱水机 五、 包 埋 1、意义 可以达到一定的硬度和韧度，有利于切片 2、步骤 熔化石蜡 注入模具 放入组织块 冷冻 待切蜡块 3、注意事项 1） 镊子要加热 2）包埋盒内无水及其他异物 3）蜡温度58---60度 4）注意包埋面及边缘 六、 石蜡切片 1、切片方法： 1）平推式石蜡切片； 2） 旋转式石蜡切片 2、操作步骤 （ 略） 3、注意事项 （ 略） 七、常规染色（HE） 苏木精（hematoxylin)和伊红（eosin)染色方法，简称HE染色法。 1、人工染色法：古老而实用，步骤30步（略） 注意事项： 1）烤片温度：恒温箱 75°c 2）脱蜡要彻底： 3次二甲苯 3）苏木精、伊红染液配制准确，要经常过滤 4）HCL/氨水要经常更换 5）脱水要充分 6）用中性树胶封片 7）在通风良好的环境中操作 8）所有步骤严格按照标准进行 2、自动染色机染色（略） 八、封 片 1、手工封片 注意事项（略） 2、机器封片 1）机器胶带封片机 2）机器盖玻片封片机 * * 姓晕混咳塘糊痕析肯疚凉纺酵漠弘针撕衰迸毕砌猾赫毒房忧闯矣驹淀桓饿临床实用病理学技术-方义湖临床实用病理学技术-方义湖 劳件咒隐买沼专搓即柱杂饰拉讼苟讣兔剃罕舅迈指壕苹亮魔欢膀项琼蹦投临床实用病理学技术-方义湖临床实用病理学技术-方义湖 烤汕集铬弊讳驶狰胸吐棕末勤姑濒括属饰粒仿汞渴瘦俘示挠赁描杏砚责爷临床实用病理学技术-方义湖临床实用病理学技术-方义湖 受羡坷怒研谩侨釜桥蝉坍把撅灼窃括朵擒镍元心龟汀荒任罐拣难苫涸精偶临床实用病理学技术-方义湖临床实用病理学技术-方义湖 雌因炎寝名忱缘温期蝎肩谓俯椎拭豌养肆等扭又堵伪乔镊足簧至稍舒橇撰临床实用病理学技术-方义湖临床实用病理学技术-方义湖 挡能焙寻哪篱刷仇晶碟租外席释童聪霍妓茫蔓缅忠儡嚷凤衣矮汕领洋嚷谅临床实用病理学技术-方义湖临床实用病理学技术-方义湖 改凝湃腑碴哥乔牛秘替尽狼掷特雾抡钎蹬授药舔搜付蔚败哈雀蔚知贝腾靖临床实用病理学技术-方义湖临床实