液态发酵生产菜籽ace抑制肽的分析-analysis of rapeseed ace inhibitory peptides produced by liquid fermentation.docxVIP

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液态发酵生产菜籽ace抑制肽的分析-analysis of rapeseed ace inhibitory peptides produced by liquid fermentation

showsthattheoptimalconditionsareasfollows:initialpH7.0,solid-liquidratio1:23,concentrationsofglucose0.45%andconcentrationsofKH2PO40.8%,Undertheaboveconditions,theACEinhibitoryreached69.3%..RapeseedmealwasusedtoproducepeptidewithBacillussubtilisbyliquid-statefermentation.WithrapeseedpeptideyieldandACEinhibitoryasindexesforsinglefactortest,ThetechnologyconditionswasoptimizedforproducingrapeseedACEinhibitorypeptidesthroughliquid-statefermentationbyresponsesurfaceanalysis.Resultsshowsthattheoptimalconditionsareasfollows:fermentationtime20h,fermentationtemperature38℃,andinoculumsize1×108ind/mL,undertheaboveconditions,theACEinhibitoryreached70.95%.SeparateandpurificationrapeseedACEinhibitorypeptidesbyultrafiltration,gelfiltration,ionexchangeandHPLC,Theresultsshowsthatrapeseedpeptideswihthemolecularweightbelow3000DhasthehighestACEinhibitoryactivity.5mainpeaksareacquiredbygelfiltration,R-DhasthehighestACEinhibitoryactivity,73.5%.PurificationR-Dbyionexchange,3mainpeaksareacquired,R-D-BhasthehighestACEinhibitoryactivity,78.2%.PurificationR-D-BbyHPLC,R-D-B-Bisacquired,whichisprovedthepurepeptide.KEYWORDS:Liquid-statefermentation;RapeseedangiotensinI-convertingenzymeinhibitorypeptides;BacillusSubtilis;Separationandpurification.第一章前言油菜是世界上仅次于大豆的第二大油料作物(MurrayD,2001),我国是位居世界第一的油菜籽生产大国(USDA,2008),油菜籽资源十分丰富。菜籽粕是菜籽榨油之后的副产品,其中蛋白含量为35%~42%(王立峰,2005)。菜籽蛋白中含硫氨基酸和赖氨酸的含量较高,是一种优质的蛋白质(郁建平,1997;ChenZ.Y,1996),其氨基酸组成符合FAO/WHO推荐模式值,PER值高于其他的植物蛋白,甚至高于酪蛋白(周瑞宝,2003)。但是在菜籽蛋白中含有硫苷及其分解产物、酚类化合物和植酸等有害物质,使其运用受到了一定的限制(JensenS.K,1995;LiJianfan,1995)。近年来,随着双低油菜的培育成功(傅廷栋,2004)和对菜籽粕脱毒技术(MahajanA,1998)的发展,菜籽蛋白的利用得到了很大的提升,为菜籽蛋白产品的进一步开发利用打下了坚实的基础。生物活性肽一般指分子量在3000Da以下具有功能性质肽类。随着蛋白质生物化学、生理学和营养学的发展,人们发现蛋白质在人体内的吸收不再像以前所认为的那样以氨基酸形式吸收,更多的是以低肽(二肽,三肽)的形式吸收,某些低肽不仅能提供人体发育生长所需的营养物质,而且同时具有防病治病、调节人体生理机能的功效(Korhonen,H.,2006;Vioque,J,2000)。研究表明,将菜籽蛋白水解可以产生许多具有生理活性的小肽类物质,这些小肽具有促细胞生长、抗艾滋病、抗氧化、抗肿瘤、抗高血压等生物活性(YoshinoriMine,2006;曾晓波,2004;DeParis,2003),这也为菜籽蛋白的加工利用提供了一条新的途径。在众多生物活性肽中,具有降血压活性的血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂成为了最受关注肽之一。目前用于治疗高血压主要的药物

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