cyr61在机械通气性肺损伤中作用机制的分析word格式论文.docxVIP

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2018-05-18 发布于上海
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cyr61在机械通气性肺损伤中作用机制的分析word格式论文.docx

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cyr61在机械通气性肺损伤中作用机制的分析word格式论文

AbstractPart 1：The effect of mechanical stretch ofA549 cells on cell activity and inflammatory factorIL-8 expressionSummaryObjectiveToinvestigatetheeffectofcyclicmechanicalstretchoftypeⅡalveolarepithelialcells(A549cells)onthecellapoptosisandthesecretionofIL-8.MethodsA549cellswerestretchedfordifferentperiods(0min,15min,30min,60min, 120min)atstrain15%,0.5Hz.Thecellapoptosiswasobservedinthedifferentperiods.mRNAandproteinofinterleukinIL-8wereassessedbyRT-PCRandEnzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA).ResultsAtstrain15%,0.5Hz,thecellapoptosisofA549 cellsincreasedwiththestretchingtime.ThemRNAandProteinofinterleukinIL-8increasedinatimeanddose-dependentmanner.ConclusionMechanicalstretchcaninducecellapoptosisandsecretionofIL-8inhumanAlveolartypeⅡA549,whichisdependonstretchingtime.Keywords: Human Alveolar typeⅡepithelial cells；Mechanical stretch；Apoptosis；Interleukin(IL)-8Part 2:The construction of siRNArecombinant expression vector targeting Cyr61 geneSummaryObjectiveToconstructSiRNArecombinantexpressionvectortargetingCyr61gene，andtoscreenthestablytransfectedcellclone．MethodsThreeSiRNAssequencesbasedonthesequenceofCyr61mRNAintheGenBankweredesignedandsynthesized，andascrambledSiRNAsequencesservedasnegativecontrol.ThecDNAwassynthesizedand inserted intoplasmid pGenesil1.1.The plasmids was sequenced toconfirmtheinsertedsequence．RT-PCRand WesternblotanalysiswereusedtoassessthelevelsofCyr61mRNAandproteinsaftertheconstructedplasmidshadbeentransfectedintoA549 cells.Apoptoticratiowasdetectedbyflowcytometry.ResultsItwasconfirmedby restrictionendonucleaseandsequenceanalysisthatSiRNArecombinantexpressionvectortargetingCyr61genewasconstructedsuccessfully.InhibitionratioofCyr61SiRNAatmRNAandproteinlevelswere60.54％and52.97％.ConlusionTheSiRNArecombinantexpressionvectortargetingCyr61genehasbeenconstructedsuccessfullyandcaninhibitetheexpressionofCyr61geneinA549cellssignificantly.Keywords:HumanAlveolartypeⅡepithelialcells；RNA interference；SiRNA；ApoptosisPart 3：The effect of interference on Cyr