b c基因型乙型肝炎病毒调控元件的活性差异及机制研究word格式论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 目 录  HYPERLINK \l _bookmark0 摘 要 1  HYPERLINK \l _bookmark1 Abstract 2  HYPERLINK \l _bookmark2 前 言 4  HYPERLINK \l _bookmark3 第一部分 B、C 基因型 HBV 调控元件保守序列的确定及报告质粒的构建 6  HYPERLINK \l _bookmark4 引 言 6  HYPERLINK \l _bookmark5 材料与方法 7  HYPERLINK \l _bookmark6 结 果 20  HYPERLINK \l _bookmark7 讨 论 27  HYPERLINK \l _bookmark8 小 结 29  HYPERLINK \l _bookmark9 第二部分 B、C 基因型 HBV 调控元件活性的比较分析 30  HYPERLINK \l _bookmark10 引 言 30  HYPERLINK \l _bookmark11 材料与方法 31  HYPERLINK \l _bookmark12 结 果 35  HYPERLINK \l _bookmark13 讨 论 39  HYPERLINK \l _bookmark14 小 结 41  HYPERLINK \l _bookmark15 第三部分 B、C 基因型 HBV 增强子Ⅱ活性差异机制的初步研究 42  HYPERLINK \l _bookmark16 引 言 42  HYPERLINK \l _bookmark17 材料与方法 43  HYPERLINK \l _bookmark18 结 果 51  HYPERLINK \l _bookmark19 讨 论 61  HYPERLINK \l _bookmark20 小 结 64  HYPERLINK \l _bookmark21 结 论 65  HYPERLINK \l _bookmark22 参考文献 66  HYPERLINK \l _bookmark23 附录一 英文缩略词表 73  HYPERLINK \l _bookmark24 附录二 试剂配方 75  HYPERLINK \l _bookmark25 附录三 主要仪器设备 78  HYPERLINK \l _bookmark26 致 谢 79  HYPERLINK \l _bookmark27 综 述 80  HYPERLINK \l _bookmark28 乙型肝炎病毒转录调控元件的研究进展 80  HYPERLINK \l _bookmark29 参考文献 88 B、C 基因型乙型肝炎病毒调控元件的活性差异 及机制研究 摘 要 尽管安全有效的疫苗应用至今已有近三十年，但乙型肝炎病毒的感染仍然是全球重 大的公共卫生问题之一。基于 HBV 基因组序列的差异目前将其分为 A~J 十个基因型， 我国是 HBV 感染的高发区，广泛分布的主要是 B 和 C 两种基因型。研究发现 B、C 基 因型 HBV 感染者在病毒学、临床表现及对干扰素的反应方面存在较大差异。但目前为 止引起 B、C 基因型 HBV 表现差异的具体机制尚未完全阐明。 HBV 全长 3.2kb，其调控元件包含 C、S1、S2 与 X 四个启动子以及 EnhI 和 EnhII 两个增强子。鉴于 HBV 调控元件对其复制、转录及蛋白表达的重要调控作用，我们通 过对 B、C 基因型 HBV 调控元件的活性进行比较分析，以期找出两个基因型表现差异 的原因及机制。 本研究第一部分通过对 B、C 基因型 HBV 序列进行同源分析，分别获得这两个基 因型 HBV 基因组的保守序列。之后以本实验室保存的病毒株作为模板进行调控序列的 扩增，并将差异位点序列突变为保守序列，成功构建了 B、C 基因型保守的 HBV 各调 控元件的萤火虫荧光素酶报告质粒，为后续研究奠定了基础。 第二部分通过比较 B、C 基因型保守的 HBV 各调控元件的活性发现 Xp-EnhI、Xp、 及 BCp 活性 B、C 基因型间无统计学差异，Cp-EnhII、Cp 及 SpI 活性 B 型高于 C 型， 而 SpII 活性 B 型低于 C 型。随后通过对 SpII 进行 B、C 基因型 3’端置换发现两个区域 对 SpII 活性均有较大影响。 第三部分通过比较证实 B、C 基因型 HBV EnhII 活性确实存在差异，并在 B 型 Enh