annexina2在新 疆哈萨克族食管鳞癌中的表达及在食管鳞癌细胞eca109中作用的分析word格式论文.docxVIP

英文缩略语对照表英文缩写英文全名中文译名bpBase pairs碱基对cDNAComplementaryDNA互补脱氧核糖核酸DABDiaminobenzidine二甲基联苯胺DEPCDiethyl pyrocarbonate二乙基焦碳酸盐DMEMDulbecco’sminimumessential mediumDMEM培养基DMSOdimethy sulfoxide二甲基亚砜ECEsophageal Cancer食管癌ESCCEsophagus squamous cell carcinoma食管鳞状细胞癌FITCFlouresceinisothiocyante异硫氰酸荧光素FCMFlowcytometry流式细胞术MTT3-（4，5）-dimethylthiahiazo（-z-yl）-3，5-diphenytetrazoliumromide四甲基偶氮噻唑蓝mRNAMessengerRNA信使核糖核酸ODOptical density光密度值PBSPhosphatebuffersaline磷酸盐缓冲液PIPropidiumiodide碘化丙啶PVDFPolyvinglidenedifluoride聚亚乙烯双氟化物qRT-PCRreal-timequantitative polymerasechainreaction实时荧光定量聚合酶链反应SDSSodiumdodecyl sulfate十二烷基磺酸钠TEMEDN,N,N’,N’-tetrmethyl ethylanedimineN,N,N’,N’-四甲基乙二胺TrisTrihydroxy methlamino methane三羟甲基氨基甲烷目录摘要………………………………………………………………………………………1Abstract…………………………………………………………………………………2前言………………………………………………………………………………………3 研究内容与方法……………………………………………………………………………6 1.研究对象………………………………………………………………………6.内容与方法………………………………………………………………………8.技术路线图………………………………………………………………………17结果………………………………………………………………………………………18讨论………………………………………………………………………………………28小结………………………………………………………………………………………33致谢………………………………………………………………………………………34参考文献…………………………………………………………………………………35综述………………………………………………………………………………………40攻读硕士学位期间发表的学位论文……………………………………………………51导师评阅表………………………………………………………………………………52AnnexinA2 在新疆哈萨克族食管鳞癌中的表达及在食管鳞癌细胞Eca109中作用的研究研究生：李秀凌导师：卢晓梅教授摘要目的：检测AnnexinA2 在新疆哈萨克族食管鳞癌中的表达变化，并探讨AnnexinA2 的表达对人食管鳞癌细胞Eca109增殖、迁移侵袭等恶性生物学行为及细胞周期和凋亡的影响。方法：组织水平上，利用免疫组化实验检测77 例新疆哈萨克族食管鳞癌中AnnexinA2的表达并统计分析其表达量与临床病理资料的相关性；细胞水平上，采用基因过表达技术上调Eca109细胞中AnnexinA2的表达，采用qRT-PCR 和Westernblot技术分别检测AnnexinA2mRNA和蛋白水平变化；赛唑蓝（MTT）比色法研究其对食管鳞癌细胞Eca109 的存活状态及增殖能力的影响；采用划痕实验观察其对细胞迁移能力的影响，并用Transwell侵袭小室实验检测细胞侵袭能力；流式细胞术检测其对Eca109 细胞周期及细胞凋亡的影响。结果：AnnexinA2 在新疆哈萨克族食管鳞癌组织中的表达显著性低于对应的癌旁正常组织(P0.05)，其表达量与肿瘤分化程度正相关(P0.05)，与肿瘤浸润深度呈负相关(P0.05)。细胞水平上，分别提取AnnexinA2 过表达组、正常培养组、空白质粒组的mRNA和蛋白质，经检测过表达组的AnenxinA2表达水平较对照组表达显著增高（P0.05）；MTT实验显示AnnexinA2 过表达细胞的增殖能力显著低于对照组（P0.05），同时细胞迁移能力较对照组也显著下降（P0.05）；AnnexinA2 过表达组侵袭能力较对照组则有所降低；过表达AnnexinA2的Eca109细胞细胞阻滞于G2/M期，但是AnnexinA2过表