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(阿贝公式（Abbe`s equation）: δ=0.61λ/nsinα  λ-是光波在真空中的波长 ； α-孔径角的一半； n-透镜和物体间介质的折射系数。 如果V=100KV时，λ=0.0037nm，比可见光光波短了10万倍。如果用电子波作为显微镜的照明，则分辩率(δ)可达0.002nm。 例如，通以直流电的螺线管所产生的轴对称磁场可以使通过它的电子束会聚，与玻璃镜使光束会聚相似。 电镜区别于光镜的主要点是：用电子束代替光束；磁透镜代替玻璃透镜。由于使用了极短的电子波，所以能获得极高的分辩本领。 3 图象视埸较小，一般为二维结构平面图象。 4 应用范围广 主要用于研究生物样品局部切面的超微结构、生物大分子结构以及冷冻蚀刻复型膜结构研究。 透射电子的穿透能力是由加速电压的大小所决定的。当50-100KV加速电压时，其透射电子的能量极小，仅能穿透50nm左右的超薄切片和复型膜；当加速电压达到300KV以上时，透射电子才能穿透较厚的样品，但此类电镜造价较高，很难普及。 超高压电镜特点： 1 分辨率高 该电镜加速电压高，穿透力强，分辨率高，对样品损伤小。 2 制片技术 该电镜可观察厚样品和含水的样品，如利用特殊的压力样品室，研究生活细菌和培养细胞等。 3 图象特点 可观察细胞表面、内部及细胞骨架结构，还可通过叠加法对图象进行立体化处理。 4 适用范围 可广泛应用于医学生物研究中厚样品和含水样品的超微结构观察细菌和培养细胞的直接观察。 电镜的电子束波长约为0.005 nm，其分辨率的理论推测值为0.0025 nm，但实际上，目前应用的透射电镜只能达到0.2 nm，尚有较大的差距。 在高真空的环境下，自由电子受上万伏加速电压的作用，以及下方阳极的吸引，大量自由电子向下发射，形成电子束，这个电子束相当于光镜的可见光源。 磁场的强度与线卷数（N）和通过导线的电流（I）成正比，即IN越大，磁场越强。IN越小，磁场越弱。在线卷内磁场是比较集中的，加入极靴后磁场更为集中。 扫描电镜 电镜的透镜系统 电镜的透镜都是电磁透镜。其结构主要都是成组的线卷包在铁壳之中。线卷中央插入极靴，通电后形成磁场，这样的磁场相当于光镜的双凸透镜。可以使通过的电子束发生偏转，并把电子束会聚起来。 透射式电子显微镜的基本组成 完整的电镜由电子光学系统（镜筒）、真空系统和电路系统三部分组成。 1 镜筒部分又可分为照明系统（电子枪、聚光镜）；成像系统（包括样品室、物镜、中间镜、投影镜）；观察记录系统（观察室、照像机械）。 2 真空系统 包括机械泵、油扩散泵、真空管道及开关阀门、真空测量。 3 电路系统 包括高压发生器及电子枪灯丝加热发生器、稳压电路、稳流电路、自动控制电路。 若极靴的孔径为D，极靴上下极的距离为S，则D/S数值越小，磁场越集中，D/S值越大，磁场越分散。磁场越强越集中，就能将电子束在较短的距离内会聚起来，这就是短焦距透镜。磁场越弱越分散，电子束就在较长距离处会聚，这就是长焦距透镜。 超薄切片的基本操作过程 1 取材 （快速而准确地切取动物或植物组织（快 准 轻 小） 2 细切 （在预冷冻的固定液中，用锋利刀片将取下的组织切成1立方毫米的小块） 3 前固定 （用醛类固定液固定组织几小时，使细胞生命活动停止，并使其精细结构得到良好的保存,常用2%戊二醛的磷酸缓冲液1/10或1/15M） 4 清洗 （上述缓冲液清洗组织数小时，中间换液数次） 5? 后固定 （用锇酸后固定组织，时间一般不超过2小时，锇酸浓度为0.5-1%（克/毫升浓度）6 清洗 （缓冲液清洗组织半小时以上）7?脱水 （丙酮系列脱水，梯度丙酮从50%开始,中间70%,80%,90%,100%,每级15分钟,）8 浸透 （环氧树脂浸透15-30分钟，再入包埋剂浸透数小时或过夜） 9 包埋 （用包埋剂包埋样品，而后高温聚合（摄氏60度，36-48小时）,包埋剂品种较多可根据各电镜实验室的具体情况灵活选用10?超薄切片机切片，并将样品薄片置于铜网上11 电子染色（又称重金属染色 先进行醋酸铀染色30-45分钟（醋酸铀染液通常用水或50%乙醇配制成饱和溶液），经缓冲液清洗后,再柠檬酸铅染色30分钟。 * *  电子显微镜 300年前光学显微镜的发明，使人眼的分辩力由0.2mm提高到0.2μm，提高一千倍。而光镜分辩率(δ)受限的原因