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实验二 果蝇的双因子实验
材料与方法: 材料:黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)果蝇饲养和选择亲本 实验前首先将上述两种果蝇分别饲养,待培养瓶里出现幼虫和蛹以后将老果蝇处理掉,然后,在刚从蛹里羽化出来的果蝇中选择杂交亲本,雌果蝇必须是处女蝇。挑选的数量依据实验的要求而定。 果蝇的纯合亲本杂交 挑选灰身长翅(或黑身残翅)处女蝇和黑身残翅(或灰身长翅)雄果蝇各5只,放入培养瓶中,进行正反交实验,即 (1)正交:灰身长翅(♀) × 黑身残翅(♂) (2)反交:黑身残翅(♀) × 灰身长翅(♂) 亲本果蝇选定并全部放入杂交瓶中以后,在杂交瓶上贴上标签,标明杂交亲本,杂交日期、实验人姓名。同样将杂交果蝇要放在23℃恒温箱里饲养,如果室温能达到果蝇适宜环境温度,也可在室温条件下饲养。 去掉亲本 果蝇培养7—8天,观察培养瓶中是否有幼虫和蛹的出现,如果已经出现就可以去掉亲本,一定要注意去除干净。 卡平方检测 若P 0.05时,说明符合两对基因自由组合的假说,若P 0.05时,说明这个实验数据不能用两对基因自由组合来解释。但这是一个验证性实验,两对基因位于不同对的染色体上是毫无疑问的。如果P 0.05时,只能从其它方面查找原因了,如亲本的处女蝇是否准确;去亲本时去干净了没有;父本的选择有没有错误;亲本原种纯不纯等。 ) 观察 日期 正交:灰体残翅 (♀)× 黑檀体长翅(♂) 灰体长翅数 灰体残翅数 黑檀体长翅数 黑檀体残翅数 合计 表3 F1代反交统计结果登记表 观察 日期 反交:黑檀体长翅(♀) × 灰体残翅(♂) 灰体长翅 灰体残翅 黑檀体长翅 黑檀体残翅 合计 观察并统计F2代表型及各种表型的个体数,特别要注意新性状组合个体的出现,计算不同表型个体数的比例,确定这两对基因的遗传规律,将统计结果填入表4 表4 对F2代正交统计结果登记表 观察 日期 正交:VgVg++(♀)×++ee(♂) 反交:++ee(♀)×VgVg(♂) 灰体长翅 灰体残翅 黑体长翅 黑体残翅 灰体长翅 灰体残翅 黑体长翅 黑体残翅 合计 观察并统计 F2 代表型及各种表型的个体数,特别要注意新性状组合个体的出现,计算不同表型个体数的比例,确定这两对基因的遗传规律,将统计结果填入下列表5中: 表5 对 F2 代反交统计结果登记表 观察 日期 正交: VgVg ++ ( 雌 ) ×++ ee( 雄 ) 反交:++ ee (雌)× VgVg ++ ( 雄 ) 灰长 灰残 黑长 黑残 灰长 灰残 黑长 黑残 合计 根据以上统计的结果,对 F2 代的统计结果作 x 2测验,填入下列表四中: 对 F2 正交结果作 x 2测验(表6): 表6:F2代正交结果做x 2测验 灰体长翅数 灰体残翅数 黑檀体长翅数 黑檀体残翅数 合计 实际值( o ) 理论值( c ) 偏差( o - c ) (o - c) 2 /c f x 2 P 对 F2 代反交结果作 x 2测验(7) 表
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