实验五 果蝇的饲养形态观察和变异分析.docVIP

实验五 果蝇的饲养、形态观察和变异分析 ? 一、实验目的 1．了解果蝇的生活史及几种突变类型； 2．通过观察雌雄果蝇的特征，学习鉴别雌雄果蝇的方法。 3．学习果蝇的培养方法。 二、实验原理 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。用果蝇作为实验材料有许多优点： 1. 饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 2. 生长迅速。十二天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。 3. 染色体数少。只有4对。 4. 唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。 5. 突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。 （一）果蝇的生活史：果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20～25℃。 生活周期长短与饲养温度的关系 ? 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 卵→幼虫 幼虫→成虫 57天 18天 8天 6天 5天 4天 果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生活史如下： 雌蝇 →减数分裂 → 卵 受精 雄蝇 →减数分裂 →精子 ? 第一批成虫 羽化（第八天） （可活26～33天） 产第一批卵 ? 蛹（第四天） ? 第二次蜕皮 第一批卵孵化 （第二天） （第零天） ? 第一次蜕皮 幼虫 （第一天） 果蝇的生活周期和各发育阶段的经过时间 （二）果蝇的性别及突变性状的鉴别： 果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。 果蝇的雌雄在幼虫期较难区别，但到了成虫期区别相当容易。雄性个体一般较雌性个体小，腹部环纹5条，腹尖色深，第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳（Sex combs）。雌性环纹7条，腹尖色浅，无性梳。 实验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定，例如红眼与白眼，正常翅与残翅等。而另一些性状可在解剖镜下鉴定，如焦刚毛与直刚毛等。 三、实验准备 1．仪器 显微镜1台、解剖镜1台、培养箱1台（通用）、消毒锅1台（通用） 2．器械（均放在小磁盘内） 镊子2、解剖针2、玻片架1、毛笔2、广口瓶2、玻璃板（10×10cm）2、 3．药品（4人一套） 乙醚、50％乙醇、蒸馏水10L（通用） 4．耗材 载玻片4、盖玻片6、滤纸2、擦镜纸1本（通用）、棉花、纱布、果蝇培养基 5．材料 果蝇（常年培养） 四、实验步骤 （一）麻醉 1．将乙醚（2～3滴）滴在麻醉瓶的棉塞上（注意不要让乙醚流进瓶内），塞紧瓶塞(麻醉瓶必须干燥而洁净，否则会粘住果蝇翅膀，影响观察。)。略等l-2分钟。 2.麻醉果蝇时，先将长有果蝇的培养瓶在海棉垫上敲，使果蝇全部震落在培养瓶底部，然后迅速打开培养瓶的棉塞，把果蝇倒入去盖的麻醉瓶中，并立即盖好麻醉瓶。（果蝇的麻醉程度看实验要求而定，对仍需培养的果蝇，以轻度麻醉为宜。但对不再培养，单单进行性状观察的果蝇可以深度麻醉，甚至致死也无妨。果蝇翅膀外展45(角，说明死亡）。 3．约过20分钟，将完全麻醉了的果蝇拍落在白瓷板上，用毛刷将其集中排列在白瓷板中央成一行，在手持放大镜下进行观察。 4．若在观察过程中果蝇苏醒了(通常可被麻醉5一l0分钟)需要再麻醉时，可滴几滴乙醚入再麻醉皿的滤纸(或棉球)上，立即扣住复苏的果蝇，数秒钟以后续续观察。 5．用解剖针轻轻拨动果蝇的翅膀或腹部，翻转其背腹面，仔细检查其性别和表型特征。 6．检查完毕后，把不需要的果蝇倒入盛有煤油或酒精的瓶中（死蝇盛留器）。清理各自的麻醉瓶等用具，以防混杂。 果蝇外部形态的观察 果蝇分头、胸、腹三部分。头部的前端钝而平突，有一对大的复眼，三个单眼和一对触角，触角芒呈羽毛状。胸部有三对附肢，一对翅膀，在翅与第三对附肢间有一对平衡棒。腹部背面有背板和色素带。腹面有腹片，外生殖器在腹部腹面的末端。 （三）果蝇成虫的性别鉴定：参照表1及图1，2，对D．melanogaster的成虫进行雌雄鉴别： 表1．D．melanogaster成虫性别差异 ＼ 性 ＼ 别 项 ＼ 特 目 ＼ 征