色谱定性 武汉大学.pptVIP

* 内标法特点 (a) 内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不大。 (b) 每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。 (c) 若将内标法中的试样取样量和内标物加入量固定，则： 内标法的缺点：在试样中增加了一个内标物，这常常给分离带来一定的困难。 * 3 峰面积归一化法 特点及要求： 归一化法简便、准确；进样量的准确性和操作条件的变动对测定结果影响不大； 仅适用于试样中所有组分全出峰的情况。 适合于对多组分试样中各组分含量的分析。 缺点：经过色谱分离后，样品中所有的组分都要能产生可测量的峰 * 各种定量方法的比较 方 法 项 目 归一化法 内标法 外标法 计算公式 由工作曲线直接查得 称重配样 不需要 需要 不需要 进样量 不需准确 不需准确 需准确 操作条件稳定性 一次分析过程中条件需稳定 一次分析过程中条件需稳定 全部过程中条件需严格不变 对组分出峰的要求 全部组分 内标物及所测组分 所测组分 校正因子 需全部组分的校正因子 需内标及所测组分的校正因子 不需要 使用检测器 通用型检测器 选择性检测器有时不适用 选择性检测器 适用范围 多组分试样中各组分含量的分析 微量组分的精确定量 日常控制分析和大量同类样品的分析 * 色谱定性分析 色谱的定性分析 （1）将已知物直接和未知物对照进行定性 （2）利用文献的保留数据进行定性 （3）利用经验规律定性 （4）与化学方法结合定性 （5）与其它仪器连用进行定性 * 1 根据色谱保留值进行定性 1.1 与已知物对照定性 在一定操作条件下，各组分的保留时间是一定值。 * 白酒中醇系物色谱示意图 若组分i的保留值与甲醇的保留值相同，即可判断组分i为甲醇。 * 峰高加入法 将已知纯样加入待测组分后，再进行一次分析，然后与待测组分原来的色谱图进行比较，若前者的色谱峰增高，则可以认为加入的已知纯样与样品中的某一组分为同一化合物。 注意：当进样量很低时，如果峰不重合，峰中出现转折，或者半峰宽变宽，则可以肯定试样中不含与所加已知纯物质相同的化合物。 白酒中醇系物色谱示意图 图中组分i+甲醇的峰较上图组分i的峰有转折出现，则可判断组分i不是甲醇。 * 1.2 其他定性方法 式中A1和C1是常数，n为分子中的碳原子数（n≥3）。 该式说明，如果知道某一同系物中两个或更多组分的调整保留值，则可根据上式推知同系物中其它组分的调整保留值 . 当没有待测组分的纯标准样时，可用文献值定性，或用气相色谱中的经验规律定性。 （l）碳数规律----在一定温度下，同系物的调整保留时间的对数与分子中碳，原子数成线性关系，即 * 式中A2和C2均为常数，Tb为组分的沸点（K）。 由此可见，根据同族同数碳链异构体中几个已知组分的调整保留时间的对数值，可求得同族中具有相同碳数的其他异构体的调整保留时间。 （2）沸点规律 同族具有相同碳数碳链的异构体化合物，其调整保留时间的对数和它们的沸点呈线性关系，即 * (3).根据保留指数定性 保留指数又称Kovasts指数，是一种较其他保留数据都好的定性参数，可根据所用固定相和柱温直接与文献值对照，而不需标准样品。 其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图所示： 将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。 * 保留指数计算方法 * 解: 已知n=7 ［例］图19-15为乙酸正丁酯在阿皮松L柱上的流出曲线（柱温100℃）。由图中测得调整保留距离为：乙酸正丁酯310．0mm，正庆烷174．Omm，正辛烷373．4mm，求乙酸正丁酯的保留指数。 即乙酸正丁酯的保留指数为775．6。在与文献值对照时，一定要重视文献值的实验条件，如固定液、柱温等。而且要用几个已知组分进行验证。 * 样品中的某些化合物与一些特征试剂反应，生成相应的衍生物。将反应前后的色谱图进行比较而定性。 (4)与化学方法结合定性 * 色谱-结构分析仪器联用 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS）, 色谱-红外光谱仪联用仪；组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Ide