生物工程下游技术复习讲义.pptVIP

*凝胶色谱分离原理？ （1）大小不同分子混合样液加入柱顶端； （2）小分子进入凝胶内部，大分子不能进颗粒内部，被排阻在凝胶颗粒之外； （3）大分子随流动相顺凝胶间隙下流，下移速率过快，首先被洗脱，而小分子进入颗粒内部，下移速率慢，与大分子拉开距离。 （4）大分子被洗脱出后，随着洗脱继续进行，小分子开始被洗脱出来。 层析剂？ 是指用于色谱分离技术中的固定相或分离介 质。 *层析剂的种类 无机（氧化铝，硅胶，活性碳） 有机（琼脂糖，纤维素，聚丙烯酰胺） 何谓乳化液？ 当将有机溶剂（通称为油）和水混在一起搅拌时，可能产生两种形式的乳浊液。一种是以油滴分散在水中，称为水包油型或O/W型乳浊液；另一种是水以水滴分散在油中，称为油包水型或W/O型乳浊液。 乳浊液稳定性和哪几个因素有关？ ①界面上保护膜是否形成； ②液滴是否带电； ③介质的粘度。 其中以第一个因素最重要。如上所述，表面活 性剂分子聚集在界面上，在分散相液滴周围形 成保护膜。保护膜应具有一定的机械强度，不 易破裂，能防止液滴碰撞而引起聚沉。介质粘 度较大时能增强保护膜的机械强度。 常用去乳化方法有那些？ ①物理法（加热、稀释、吸附等）； ②化学法（加电解质中和离子型乳浊液的电荷）； ③过滤或离心分离破乳法； ④顶替法（加入表面活性更大，但因其碳链较短难以 形成坚固的保护膜的物质，取代界面上的乳化剂，如 戊醇）； ⑤转型法（如在O/W中加入亲油性乳化剂，使乳化液 有生成W/O倾向，但又不稳定，从而达到破乳化的目 的）。 比较溶剂萃取与浸取的异同点？ 溶剂萃取法是利用液体混合物各组分在某有机 溶剂中的溶解度的差异而实现分离的。 浸取是用某种溶剂把有用物质从固体原料中提 取到溶液中的过程。 生物萃取与传统萃取相比的特殊性？ ① 组分比较复杂 ②传质速率不同（质量的传递受可溶的和不 溶的表面活性组分影响） ③ 相分离性能不同（不溶性固体和可溶性表 面活性剂的存在，对相分离的速率产生重大的 不利影响） ④ 产物的不稳定性 描述浸取的基本过程？ 从植物的叶、茎、花和根中浸取药品或风味物 质，一般先将物料干燥，有助于细胞膜的破 裂，溶剂也容易进行细胞内直接溶解溶质。 另外，可将原料滚压成片（大豆及许多植物种 子），甜菜切成薄片。 浸取过程系指出溶媒进入细胞组织溶解、浸取 目的产物后，变成浸取液的全部过程。 *什么是反胶团？反胶团的微小界面和微小水相具有哪两个特异性的功能？ 反胶团（Reversed Micelles）:是两性表面活性剂在有机溶剂中亲水性基团自发地向内聚集而成的，内含微小水滴的，空间尺寸仅为纳米级的集合型胶体。 反胶团的微小界面和微小水相具有两个特异性的功能：（1）具有分子识别并允许选择性透过的半透膜的功能；（2）在疏水性环境中具有使亲水性大分子如蛋白质等保持活性的功能。 *反胶团的制备方法？ （1）注入法 将含蛋白质的水溶液直接注入含有表面活性剂的非极性有机溶剂中去，然后进行搅拌直到形成透明的溶液为止。 （2）相转移法 将酶或蛋白质从主体水相转移到含表面活性剂的非极性有机溶剂中形成反胶团-蛋白质溶液。可得较高蛋白质浓度。 （3）溶解法 对非水溶性蛋白质可用该法。将含有反胶团（W=3-30）的有机溶液与蛋白质固体粉末一起搅拌，使蛋白质进入反胶团中，所需时间长。 反胶团萃取的特点？ 萃取进入有机相的生物大分子被表面活性分子所屏蔽，从而避免了与有机溶剂相直接接触而引起的变性、失活。 可通过调整pH、离子强度、表面活性剂浓度等来控制分离场（反胶团）--待分离物质（生物大分子）的相互作用，实现对目的物质高选择性的萃取。 反胶团萃取也是一个浓缩过程，因微水相体积仅占有机相的几个百分点。 添加盐类就可从已和主体水相分开的有机相中分离出含有目的物的浓水溶液，操作简单。 *超临界流体？ 超临界流体（SCF）：是指物质处于其临界 温度和临界压强以上而形成的一种特殊状态 的流体 。 拖带剂？ 添加后可增加物质的溶解度和萃取的 选择性。 临界状态？ 是指物质的气、液两态能平衡共存的一个边缘状态，在这种状态下，液体的密度和它的饱和蒸汽密度相同，因而它们的分界面消失，这种状态只能在一定温度和压强下实现，此时的温度和压强分别称为“临界温度”和“临界压强”。 SC-CO2为何有较好的物质萃取能力？ 二氧化碳因其临界温度低（Ｔc＝31.3℃),接近室温；临界压力小(Ｐv＝7.15MPa)，扩散系数为液