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免疫测定在临床检验中的应用的可行性 由于各种抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体，利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原，尤其采用基因工程方法制备包被抗原来检测样本中的相应抗体，都大大提高了ELISA的特异性，加之电脑化程度极高的ELISA检测仪的使用，使ELISA更为简便实用和标准化，从而使其成为最广泛应用的检测方法之一。 综上，由于ELISA具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点，使其得到迅速的发展和广泛应用 。 举例：多糖蛋白的检测ELISA试剂盒法 CRP，肺炎球菌细胞壁c多糖蛋白，一种急性时相（期）蛋白，亦称C反应蛋白，正常参考值≤10mg/L。本身由肝细胞产生能结合肺炎球菌细胞壁糖蛋白，能监测疾病的发展情况为非特异性的检验指标，很多疾病时都可以表现出来。 RIA法儿 放射免疫测定/放射免疫分析(Radioimmunoassay，RIA) 　　RIA法基本原理： 　　在放射免疫分析的实验中，加入超量的标记抗原*Ag与未标记抗原Ag（即：待测抗原）与较少量的抗体（Ab）竞争性结合。 　　如果实验结果所计量到的结合物（*Ag-Ab）放射活性较高，表示待测物的浓度较低。 　　如果所计量到的结合物放射活性较低，则表示待测物的浓度较高。 藉由标准 曲线图的分析，可以推算出待测物的浓度。 用 ELISA 法及 RIA 法检测 活性蛋白及其降解产物的测定 血浆纤维蛋白原水平与纤维蛋白 体聚合功能的测定 血浆纤维蛋白原降解产物测定 [参考值] 5mg/L [意 义] 1.增高见于原发性纤溶症,DIC(弥散性血管内凝血),恶性肿瘤,肝脏疾病,肾脏疾病,肺梗死,白血病,器官移植的排斥反应等. 血浆纤维蛋白原降解产物测定 [原理] 将FDPs单抗色酸干酶标板,加入受检血清,血清中FDPs(抗原)与包被在反应板的FDPs单抗结合,然后再加入酶标记的FDPs抗体,与包被的FDPs结合,最后加入底物显色,显色深浅与血清中FDPs含量成正相关,所得的A值可从标准曲线中计算出血清中FDPs的含量. 炎症细胞因子 　　在众多炎症细胞因子中，起主要作用的是TNF-α 、IL-1β、IL-6、TGF-β、IL-8、IL-l0等。 　　TNF-α是炎症反应过程中出现最早、最重要的炎性介质，能激活中性粒细胞和淋巴细胞，使血管内皮细胞通透性增加，调节其他组织代谢活性并促使其他细胞因子的合成和释放。 　　IL一6能诱导B细胞分化和产生抗体，并诱导T细胞活化增殖、分化，参与机体的免疫应答，是炎性反应的促发剂。 　　IL-8能刺激中性粒细胞、T淋巴细胞和嗜酸性粒细胞的趋化，促进中性粒细胞脱颗粒，释放弹性蛋白酶，损伤内皮细胞，使微循环血流淤滞，组织坏死，造成器官功能损伤。 生物活性法儿测定验证因子 具体举例白介素-2 (17到24张) 本法系根据在不同白介素-2 (IL-2)的浓度下，其细胞依赖株CTLL-2细胞存活率不同，以此检测IL-2的生物学活性。 人白介素-2生物学活性测定法 (CTLL-2细胞/MTT比色法) 试剂 (1) RPMI1640培养液 取RPMI 1640培养基粉末1袋(规格为1L)，加水溶解并稀释至1000ml，加青霉素105IU和链霉素105 IU，再加碳酸氢钠2.1g，溶解后，混匀，除菌过滤，4℃保存。 (2) 基础培养液 取新生牛血清(FBS) 10ml，加 RPMl 1640培养液90ml。4℃保存。 (3)完全培养液 取基础培养液100ml，加重组人自介素-2至终浓度400～800IU。4℃保存。 (4) PBS 取氯化钠8.0g、氯化钾0.20g、磷酸氢二钠1.44g、磷酸二氢钾0.24g，加水溶解并稀释至1000ml，经121℃ 15分钟灭菌。 (5)噻唑蓝(MTT)溶液 取MTT 0.1g，加PBS溶解并稀释成20ml，经0.22pm滤膜过滤除菌。4℃避光保存。 (6)裂解液 15％十二烷基硫酸钠溶液，使用期限不得超过12个月。 CTLL-2细胞 应为偏酸性、略微浑浊液体，传代后48～60小时用于重组人白介素-2生物学活性测定。 标准品溶液的制备 取重组人白介素-2生物学活性测定的国家标准品，按使用说明书复溶后，用基础培养液稀释至每lml含200IU。在96孔细胞培养板中，做2倍系列稀释，共8个稀释度，每个稀释度做2个孔。每孔分别留50ul标准品溶液，弃去孔中多余溶液。以上操作在无菌条件下进行。 供试品溶液的制备 将供试品按标示量复溶后，用基础培养液稀释成每lml约含200IU。在96孔细胞培养板中。做2倍系列稀释，共8个稀释度，每个