上海海洋大学《海洋环境分析技术》课件-29液相色谱固定相与流动相.pdfVIP

第十章一、液相色谱固定相

液相色谱分析stationaryphaseofHPLC

highperformanceliquid二、液相色谱流动相

chromatograph

mobilephaseofHPLC

第三节

液相色谱的固定相与

流动相

stationaryphaseand

mobilephaseofHPLC

2020/3/31

一、液相色谱固定相

stationaryphasesofLC

1.液-液分配及离子对分离固定相

（）全多孔型担体

1

由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体；早期采

用100μm的大颗粒，表面涂渍固定液，性能不佳已不多见；

现采用10μm以下的小颗粒，化学键合制备柱填料；

2

（）表面多孔型担体

（薄壳型微珠担体）

30～40μm的玻璃微球，

表面附着一层厚度为～

1

2μm的多孔硅胶。

表面积小，柱容量底；

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（）化学键合固定相

3

化学键合固定相目前应用最广、性能最佳的固定相；

:

a.硅氧碳键型：≡Si—O—C

b.硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si—C

稳定，耐水、耐光、耐有机溶剂，应用最广；

c.硅碳键型：≡Si—C

d.硅氮键型：≡Si—N

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化学键合固定相的特点

（）传质快，表面无深凹陷，比一般液体固定相传质快；

1

2

（）寿命长，化学键合，无固定液流失，耐流动相冲击；

耐水、耐光、耐有机溶剂，稳定；

（）选择性好，可键合不同官能团，提高选择性；

3

4

（）有利于梯度洗脱；

(5)存在着双重分离机制：

(键合基团的覆盖率决定分离机理)

高覆盖率：分配为主；

低覆盖率：吸附为主；

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2.液-固吸附分离固定相

种类：硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰胺等；

结构类型：全多孔型和薄壳型；

粒度：～；

510μm

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3.离子交换色谱分离固定相

结构类别：

1

（）薄壳型离子交换树脂

薄壳玻璃珠为担体，表

1%

面涂约的离子交换树脂；

2

（）离子交换键合固定相

薄壳键合型；微粒硅胶

键合型（键合离子交换基团）

树脂类别：

（）阳离子交换树脂（强酸

1

性、弱酸性）

（）阴离子交换树脂（强碱

2

性、弱碱性）

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4.空间排阻分离固定相

（）软质凝胶

1

葡聚糖凝胶、琼脂凝胶等。多孔网状结构；

水为流动相。适用于常压排阻分离。

（）半硬质凝胶

2

-

苯乙烯二乙烯基苯交联共聚物，有机凝胶；

非极性有机溶剂为流动相，不能用丙酮、乙醇等极性溶剂

（）硬质凝胶

3

多孔硅胶、多孔玻珠等；

化学稳定性、热稳定性好、机械强度大，流动相性质影响

小，可在较高流速下使用。

可控孔径玻璃微球，具有恒定孔径和窄粒度分布。

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二、液相色谱的流动相

mobilephasesofLC

1.流动相特性

1

（）液相色谱的流动相又称为：淋洗液，洗脱剂。流动

相组成改变，极性改变，可显著改变组分分离状况；

2