上海海洋大学《海洋环境分析技术》课件-28液相色谱仪器与类型.pdfVIP

第十章一、高效液相色谱仪

高效液相色谱分析HPLC

二、高效液相色谱法的特点

highperformanceliquid

chromatographfeatureofHPLC

三、流程及主要部件

第一节generalprocessandmain

高效液相色谱的assemblyofHPLC

特点与仪器

featureandinstrument

ofHPLC

感谢内蒙古大学刘志广教授

2020/3/31

一、液相色谱仪器

highperformanceliquidchromatograph

2020/3/31

二、高效液相色谱法的特点

featureofHPLC

特点：高压、高速、高效、高灵敏度。

高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。

2020/3/31

三、流程及主要部件

processandmainassemblyofHPLC

1.流程

馏分

梯度收集

淋洗

2020/3/31

2.主要部件

(1)高压输液泵

5

主要部件之一，压力：150～350×10Pa。

为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（10μm），液体

的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速

是高效液相色谱的特点之一。

应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性。

往复式柱塞泵

气动放大泵

2020/3/31

(2)梯度淋洗装置(gradientelution)

内梯度:

利用两台高压输液

泵，将两种不同极性的

溶剂按一定的比例送入

梯度混合室，混合后进

入色谱柱。

外梯度:

一台高压泵，通

过比例调节阀，将两

种或多种不同极性的

溶剂按一定的比例抽

入高压泵中混合。

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(3)进样装置

流路中为高压力工作状态，

通常使用耐高压的六通阀进样装置，

其结构如图所示：

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(4)高效分离柱

柱体为直型不锈钢管，内径～，柱长～。

16mm540cm

发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。

柱床结构和装柱质量也影响柱效。

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(5)液相色谱检测器

a.紫外检测器

应用最广，对大部分有机化合物有响应。

特点：

灵敏度高；

线形范围高；

流通池可做的很小（1mm×10mm，容积8μL）；

对流动相的流速和温度变化不敏感；

波长可选，易于操作；

可用于梯度洗脱。

2020/3/31

b.光电二极管阵列检测器

紫外检测器的重要进展；

光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特

定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。