阻断JAK2STAT3通路对大鼠急性脊髓损伤后脊髓.PDFVIP

第 39 卷 9 期 宁夏医科大学学报 2017 年 9 月 JournalofNingxiaMedicalUniversity · · 1043 文章编号 ：1674-6309（20 17 ）09-1043-05 ·论著 · 阻断 JAK2/STAT3 通路对大鼠急性脊髓损伤后脊髓 细胞凋亡及运动功能的影响 陈霄雷， 邵璐 斐， 林雷雷， 常 龙 ， 尚雁冰 ， 黑 龙 ， 丁惠强 （宁夏医科大学总医院 ，银川 750004 ） 摘要 ：目的 研究不 同剂量 AG490 对脊髓神经细胞 JAK2/STAT3 信号转导通路 的阻断作用 ，并探讨其对脊髓 神经细胞凋亡和脊髓功能的影响。 方法 取体重 220~250g 雄性 SD 大 鼠 60 只 ，对其 中 48 只使用“专用大 鼠 脊髓打击器”制作大 鼠急性脊髓损伤模型 ，模型制备成功 ，立 即腹腔注射 AG490 ，根据 AG490 注射剂量不 同分 为 A 、B 、C 、D 组 ，注射剂量分别为 0 、5 、10 和 15mg ·kg-1 ，对照组 12 只设为 E 组 ，仅打开椎板 ，不损伤脊髓 。 术 前及术后 24h 进行 BBB 评分 ，术后 24h 将大 鼠处死 ，每组取 6 只做脊髓石蜡包块进行 HE 染色和 TUNEL 凋 亡检测 ，另 6 只取新鲜脊髓组织进行 Western blot 实验检测 P-JAK2 和 P-STAT3 的表达 。 结果 HE 染色显示 脊髓组织损伤面积 比值在各组 间差异无统计学意义 （P0.05 ）；TUNEL 检测及 Western blot 检测显示对照组脊 髓凋亡细胞数及 P-JAK2 、P-STAT3 相对表达量很低 ，各 AG490 干预组凋亡细胞数及 P-JAK2 、P-STAT3 表达 量均高于对照组 （P＜0.05 ），但 随 AG490 剂量增大而减少 （P＜0.05 ），BBB 评分 随 AG490 剂量增大而升高 ，各组 间差异有统计学意义 （P0.05 ）。 结论 大 鼠急性 脊髓 损 伤后 应 用 AG490 干预对 于脊髓 损 伤 面积无 影 响 ， 但 AG490 可阻断 JAK2/STAT3 信号转导通路 ，从而抑制细胞凋亡 ，促进大 鼠双下肢运动能力 的恢复 。 关键词 ：急性脊髓损伤 ；JAK2/STAT3 信号转导通路 ；细胞凋亡 ；AG490 中图分类号 ：R744 文献标识码 ：A DOI ：10.16050/j .cnki.issn1674-6309.20 17.09.0 14 内源性 酪氨 酸激 酶 （JAK ）/信号传导和转 录 1 材料与方法 启动 因子 （STAT ）通路是近年来备受关注 的一条 1.1 实验动物及分组 细胞 内重要 的信号转导途径 。 丁惠强等[1]等研究 取体重 220~250g 雄性 SD 大 鼠 60 只 （由宁 发 现 ， 急 性 脊 髓 损 伤 （acute spinal cord injury ， 夏医科大学实验动物 中心提供 ），随机选取 48 只 ASCI ）可异 常激 活 JAK2/ STAT3 信 号 转 导 通 路 ， 使用“专用大 鼠脊髓 打击器 ”制作 的大 鼠急性脊 从而导致细胞凋亡的发生 。 AG490（tyrphosin490 ） 髓损伤模型 ， 根据 AG490 注射剂量不 同分为 A 、 是一种人工合成 的苯亚 甲基丙二腈 的脂类衍生 B 、C 、D 组 ，每组 12 只 ，注射剂量分别 为 0 、5 、10