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* 实验动物染色体标本的制备与观察 一、实验目的 初步掌握动物骨髓细胞染色体标本制备的基本过程，了解操作步骤的原理； 了解一些哺乳动物染色体的数目和特点。 二、实验原理 1、染色体的中期阻断法 材料:具有高度分裂能力的细胞 植物细胞染色体制备:常规的压片法 动物细胞染色体制备:滴片法 秋水仙素 柠檬酸钠 KCl溶液 固定剂 姬姆萨染液 姬姆萨 （ Giemsa ‘ s stain ；天青 - 伊红） 2、几种试剂的作用 一些常见动物的染色体数目： 家兔：44 野兔：48 猪：38 黄牛：60 马：64 驴子：62 骡子：63 猩猩：48 金丝猴：44 猫：38 狗：78 3、小白鼠染色体的特点：呈“U”型，全部为端着丝粒染色体； 40条（19对常+1对性） 三、实验材料与仪器 1、材料：小白鼠 2、试剂： 2%柠檬酸钠、0.1%秋水仙素（现用现配）、Giemsa染液（pH6.8） 0.4%Kcl溶液 0.067mol/L的磷酸盐缓冲液（pH6.8） 1：10Giemsa磷酸盐缓冲液（pH6.8） 固定液：甲醇：冰醋酸（3：1） 3、器材和仪器： 注射器 解剖器 移液管 载玻片 盖玻片 光学显微镜 四、实验内容 1、注射秋水仙素（按4μg/g的剂量） 2、取骨髓细胞：股骨，剪掉两端，2%柠檬酸钠冲洗，离心管收集，取下针头，反复吸打 3、低渗： 0.4%Kcl，8~10ml，37±0.5℃，10min； 1000rpm，8min 4、固定：固定液5ml，注意不要冲动细胞团块（？），轻轻吸打细胞，静置20min。固定2~3次。 5、滴片：干净、冷、湿的载玻片上，2~3滴，文火烘干。 6、染色:Giemsa染液,10min。 7、镜检。（绘图） 疑问：有的染成蓝色，有的染成紫红色，为什么？ 颈椎脱臼法 股骨 取骨髓细胞 *
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