第3章节同位素示踪技术幻灯片.pptVIP

蒸馏定氮 在碱性条件，将氨蒸出并被硼酸吸收，然后用H2SO4滴 定测量全N。 样品全N含量 式中,V1 ，V0—样品和对照消耗酸的体积 ，V2—消煮液的 定容体积，V3用于蒸馏定氮的消煮液体积。 过程 3ml 10M NaOH/ml 消煮液 部分 消煮液 定容 蒸馏 2% H3BO4（+指示剂)吸收 滴定 酸化 浓缩(2-3 ml) 密封保存 里屯伯格转化 将铵转化成N2 ，为防止大气中N2的稀释在高真空装置 进行。 2NH4+＋３NaBrO+2OH- N2+5H2O＋3NaBr 15Ｎ样品制备 BUCHI全自动凯氏定氮仪 2）杜马法(光谱) 样品N N2+(H2O、CO2 被CaO吸收)  CO(NH2)2+3CuO N2+CO2+2H2O+3Cu ? 2KNO3+5Cu Ｎ2＋Ｋ2Ｏ＋５CuO 过程 固样 (＜100 μg N) +CuO+CaO 液样(派勒斯管) 放电管(?18×150) 抽真空 焙烧(马福炉) ? 15Ｎ丰度的质谱测定 原理 N2 按( )偏转分离 15Ｎ丰度的质谱测定 离子经加速电位VD后的动 能: 进入一垂直磁场后，在 劳伦兹力作用下做圆周运 动。 ? 以上两式消去速度v得: 质谱原理图 15Ｎ丰度的质谱测定 分析公式: 因此，固定R和B，通过改变 VD (电压扫描)，就可在得到 质谱图。 MAT261 15Ｎ丰度的质谱测定 测定分析 N2分子构成概率，设原子是 14N的概率为p ,是15N的为 q，则有: 15N丰度测定 当a＜5%， 选28和29峰分析，定义： 显然 于是 测定分析 若a很高，采用 丰度适中时， 样品分析的计量关系 样品中的氮来自标记氮源的百分比,可由同位素稀释原理求出。据同位素稀释定理有： 式中：Ns 、Nf —植物中来自土壤及肥料的氮素,ap、af —植物及肥料样品的15N原子百分超。 由上式，植物N素来自肥料的百分比： * * * * * * * * * * * 有内源 此种情况下，示踪剂在系统中被稀释。对示踪剂比活度的估计，除要考虑仪器的探测效率和实验期间放射性衰减外，必需考虑稀释作用的影响。示踪剂的比活度可由如下两种方法之一估计。 估值法 式中，W，C为试样重及物质浓度或含量；Pdff为来自示踪剂的比率。 倒推法 以盆栽为例，设植株总重M2 ，试样重M1 最低计数率n (n≧4nb本底)。考虑： 不均匀分布因子P1 试样的平均计数率： 仪器的探测效率 ?　试样的活度： 总样本量M2, 供试植株的总活度： 验期间的衰变　引入时植株的活度： A3＝Ａ2Ｐ2 ， 植株的吸收利用率　应引入的活度： 回代得到： 举例 有内源物示踪实验示踪剂引入量的估计。以32P标记肥料实验为例，设实验持续100d,测量样品量取1g,植物平均含磷0.4%，其中来自肥料的比里率为Pdff(10%-50%),按25%估算，若样品用固闪杯法测量，仪器的探测效率为80%，要求计数率为2000cpm,试估算32P标记肥料的比活度。 示踪剂的准备 开瓶分装 对商业制剂进行必要稀释和转化的操作。 工作程序  1.核查包装说 例 　磷—32标记磷酸氢钠制剂 1)标记化合物名称 Na２Ｈ３２ＰＯ4 2)物理化学状态 溶液，无色透 明 3)溶液体积 5 mci/ml 4)比活度 0.5 mci/mmol 5)放射性总活度 2.5 mci 6)放射化学纯度 100% 7)测定日期 2000.3.12