血管内皮生长因子在骨形态发生蛋白-2诱导成骨细胞过程中的作用.pdfVIP

维普资讯 2007年 5月第 23卷第 5 20o7．V0I．23．No．5 · 381 · · 基 础 研 究 · 血管 内皮生长因子在骨形态发生蛋 白一2 诱导成骨细胞过程 中的作用 傅德皓 杨述华 杨操 李进 叶哲伟 郭晓东 杜靖远 【摘要】 目的 探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)在骨形态发 生蛋白一2(BMP一2)诱导成骨过程中的作用。 方法 (1)取小 鼠胚胎成骨细胞进行体外培养， RT—PCR法检测rhBMP一2(300ng／m1)诱导成骨细胞分化过程中VEGF受体 (VEGFreceptors， VEGF—R)的表达。(2)采用 VEGF反义寡核苷酸 (antisenseol唔odeoxynucleotides，ASODNs)和苏 拉明分别阻断VEGF的合成及功能，观察对成骨细胞碱性磷酸酶 (ALP)活性和钙结节形成的影响。 (3)在rhBMP一2诱导成骨的同时，添加不同浓度的外源性VEGF，观察对成骨细胞体外矿化能力 的影响。 结果 (1)VEGF—R (Flk一1和Fh一1)mRNA在成骨细胞呈稳定弱表达，rhBMP一2 干预 24h后VEGF—R的表达量无明显变化。(2)应用VEGFASODNs和苏拉明可抑制 rhBMP一2 所诱导的ALP活性和钙结节形成，并存在剂量依赖效应。(3)单独应用 VEGF并不能使成骨细胞 分化为钙结节，外源性VEGF的加入亦不影响rhBMP一2刺激钙结节形成的能力。 结论 VEGF 在成骨细胞可以自分泌的形式发挥作用，VEGF至少部分参与了rhBMP一2的诱导成骨活性。 【关键词】 血管内皮生长因子 ；骨形态发生蛋白质类 ；成骨细胞； 细胞培养 Role of vascular endothelial growth factor in osteogenesis induced by bone morphogenetic protein-2 FUDe—hao， ⅣGShu—hua， ⅣGCao，LIJin，yE e—wei，GUDXiao一面 ，DUJing— yu,an．DepartmentofOrthopedics，UnionHospital，TongfiMedcialCollege，HuazhongUniversityofScience and Technology．Wuhan43oo22． ina Correspond ingauthor： ⅣGShu—hua，Email：shuhuayabc@vip．sina．com A【bstract】 Objective Toinvestigatetheroleofvascularendothelialrgowthfactor(VEGF)in theosteogenesisinducedbyrecombinanthumanbonemorphogeneticprotein一2 (rhBMP-2)． Methods (1)Calvariaosteoblastsofa19一dayfetalmousewereculturedandgeneexpressionofVEGFreceptors intheprocessofOsteogenesisinducedbyrhBMP一2(300ng／m1)wasexaminedbyreversetranscription— polymerasechainreaction(RT—PCR)．(2)Toobservetheinfluenceonalkalinephosphatase(ALP)ac— tivityandbonenoduleformationofosteoblastsaftertheinhibitionofVEGF synthesisand function by VEGFantisenseoligodeoxynucleotides(VEGFASODNs)andsuraminrespectively．(3)B